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上海N-聚糖水解酶PNGaseF去糖基化酶糖生物学研究

来源: 发布时间:2024年10月09日

Genovis的PNGase F Automation 含有以自动化友好的 96 孔板形式冻干的 PNGase F 酶。它能够实现高通量 N-糖去除,从而简化一系列糖蛋白底物的下游分析。根据您的工作流程要求和样品可用性。PNGase F Automation 可在 96 孔板中冻干,用于 96 x 5 μg 或 96 x 50 μg 糖蛋白上的 N-糖自动水解。1. 实现自动化高通量样品处理;2. 可同时消解多达 96 个样品;3. 两种选择可用于不同样品量的消解;4. 即用型 - 只需添加您的样品即可。用于消化粘蛋白型O-糖蛋白和肽(包括唾液酸化O-聚糖)的冻干酶。Genovis的ImpaRATOR 冻干剂以冻干粉末的形式提供,装在 2000 单位小瓶中,用于消化 2 mg O-糖基化蛋白。1. 用于方法开发的灵活产品形式;2.以结合酶以提高效率;3. 适用于自动化工作流程;4. 即用型 - 只需加水即可!用于糖蛋白去唾液酸化的冻干酶混合物SialEXO 冻干剂以冻干粉的形式提供,装在 2000 个单位的小瓶中。上海N-聚糖水解酶PNGaseF去糖基化酶糖生物学研究

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Genovis 集团由瑞典 Genovis AB 和美国全资子公司 Genovis Inc. 组成。该公司的在纳斯达克北方增长市场上市。如需了解更多信息,请访问投资者关系。 Genovis的经营理念是为生物制药和研究行业的客户提供工具,以促进和节省开发新治疗方法和诊断的时间。Genovis 酶产品,称为 SmartEnzymes,被世界各地的科学家使用,创新的产品形式促进了生物药物的开发和质量控制。 通过在2020年收购QED Bioscience,产品组合已扩大到包括用于研究、生物药物开发和诊断检测的抗体和试剂。在 网站 上阅读有关QED的更多信息 Genovis 研发活动的基石是客户关系,使产品开发能够满足客户需求。与专注于表征新酶、开发新工作流程和新靶点抗体的学术团体的合作同样有价值。上海N-聚糖水解酶PNGaseF去糖基化酶糖生物学研究OmniGLYZOR Microspin 小柱中包含以下组分:PNGase F;O-糖苷酶。

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OglyZOR 来源于口腔链球菌,在大肠杆菌中表达。该酶含有 His 标签,分子量为 227 kDa。SialEXO来源于Akkermansia muciniphila,在大肠杆菌中表达。SialEXO酶含有His标签,组分的分子量分别为42 kDa和66 kDa。1.高效O-糖苷酶;2. 降低样品异质性,揭示潜在的关键蛋白质修饰;3. 完全、稳健地去除 O-糖he心 1 二糖。Genovis的冻干酶,用于水解糖蛋白上的he心1 O-聚糖。OglyZOR 冻干剂以冻干粉的形式提供,装在 2000 个单位的小瓶中,用于在 2 mg 糖蛋白上水解he心 1 O-聚糖。它需要去除唾液酸助剂才能发挥作用,因此与2000单位的SialEXO冻干一起提供。

GalactEXO中的酶来源于Akkermansia muciniphila,并在大肠杆菌中表达。GalactEXO由两种半乳糖苷酶组成,均带有His标签,组分的分子量为87 kDa和109 kDa。用于水解糖蛋白上β1-3,4-连接半乳糖的冻干酶。Genovis的GalactEXO 冻干剂以冻干粉的形式提供,装在 2000 单位小瓶中,用于在 2 mg 糖蛋白上水解 β1-3,4-连接的半乳糖。1. 用于方法开发的灵活格式;2. 可以结合酶以提高效率; 3. 适用于自动化工作流程;4. 即用型 - 只需加水即可!将混合物加载到GlycOCATCH上,洗涤树脂,并用8M尿素洗脱结合的肽。纯化后,在RP-LC-MS上分离样品。数据显示,糖苷酸肽的选择性纯化,携带he心1-O-聚糖。IgA 特异性 O-糖肽富集:IgA 抗体包含 N-连接的糖基化和重度 O-糖基化的铰链区域。胰蛋白酶消化IgA后,将肽和genovis 的SialEXO的混合物加载到GlycOCATCH树脂上,并用PBS和离心洗涤。用 8 M 尿素洗脱显示预期的 O-糖基化铰链肽富集,具有不同程度的糖基化。OglyZOR 是一种内切糖苷酶,可特异性水解天然糖蛋白上的he心 1 O-聚糖;

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与PNGase F类似,Genvois的OmniGLYZOR 含有固定化酶的混合物,可快速有效地去除抗体、融合蛋白和其他糖基化蛋白上的 N 和简单的粘蛋白型 O-聚糖。聚糖的去除被用于减少异质性,以促进蛋白质的分析,例如质谱法。去糖基化也可用于研究聚糖的功能作用。N-和粘蛋白型O-连接聚糖的快速高效去糖基化;即用型离心柱形式 - 无酶干扰分析;与LC-MS兼容。与PNGase F类似,Genvois的与PNGase F类似,Genvois的OmniGLYZOR 含有去除 N-糖和最常见的粘蛋白型 O-糖所需的酶,即单唾液酸和二唾液酸he心 1 和 Tn 抗原 (α-GalNAc)。OmniGLYZOR Microspin 小柱中包含以下组分:PNGase F;O-糖苷酶。瑞典生物技术公司Genovis率先次提供IdeS工具酶等,用于mAb、ADC药物的开发、生产和质量控制。上海N-聚糖水解酶PNGaseF去糖基化酶糖生物学研究

为了测试选择性,将一系列 O-糖基化、N-糖基化和非糖基化蛋白与 GlycOCATCH 一起孵育:洗脱O-糖基化蛋白。上海N-聚糖水解酶PNGaseF去糖基化酶糖生物学研究

当在完整状态下进行分析时,EPO的聚糖异质性导致了非常复杂的质谱图。通过在 37°C 下在 OmniGLYZOR Microspin 柱上孵育 1 小时,可以有效地去除 N 糖(含有PNGase F酶)和 O-糖,如对应于未修饰蛋白质的单个峰所示。EPO上残留了少量用乙酰化唾液酸修饰的O-聚糖,因为OmniGLYZOR对这种结构的水解效率低下。根据制造商Genvois的建议(在37°C下进行O/N孵育),两种底物蛋白也用另一种市售的去糖基化产物处理,并显示数据以供比较。另一方面,N-聚糖在内质网中翻译地连接到未折叠的蛋白质上。这导致某些 N-糖基化位点难以被 Genovis的PNGase F 接近,或者一旦底物蛋白折叠成其天然状态,就根本无法接近。因此,这种N-聚糖的水解需要底物蛋白以与酶活性相容的方式变性。上海N-聚糖水解酶PNGaseF去糖基化酶糖生物学研究

标签: 高盐核酸酶