北京用于自动化系统的96孔板形式PNGaseF去糖基化酶

GlycOCATCH®亲和纯化：用于粘蛋白型O-糖蛋白和肽亲和纯化的富集树脂。GlycOCATCH亲和纯化以方便的离心柱形式提供。该产品包含：4 个 GlycOCATCH 亲和纯化微离心柱，每个柱能够结合 50 μg 粘蛋白型 O-糖蛋白（总共 200 μg）。Genovis的SialEXO 冻干 200 单位，用于去除唾液酸；OpeRATOR 冻干 200 单位，用于结合的 O-糖蛋白的可选洗脱方法。1. 靶向 O-糖蛋白富集；2. 复杂样品的特异性净化；3. 用于改进 MS 分析的样品制备。O-糖基化蛋白和肽的特异性富集：O-连接聚糖参与多种生物过程，包括抑制病原体引起的gan染、炎症反应、造血和细胞信号传导。应用：降低样品复杂性、电荷异构体分析和外切糖苷酶阵列。北京用于自动化系统的96孔板形式PNGaseF去糖基化酶

糖蛋白性能测试：O-聚糖的岩藻糖基化参与功能上重要的聚糖表位的合成，例如血型抗原和刘易斯结构。分析用这种复杂的聚糖结构修饰的糖蛋白可能具有挑战性，需要高效和特异性的酶工具。我们在许多糖基工程TNFR蛋白上测试了Genovis的FucosEXO，这些蛋白携带多达11个O-聚糖，这些O-聚糖以不同的键装饰。我们将该活性与其他市售岩藻苷酶进行了比较。FucosEXO 能够在 1 小时内对所有三种 TNFR 蛋白进行去岩藻糖磺酸处理，而用其他岩藻糖酶处理导致部分去除岩藻糖或根本没有去除。北京用于自动化系统的96孔板形式PNGaseF去糖基化酶使用 GalactEXO 冻干和 GalactEXO 固定化都可以看到向 G0F 糖型的转变。

FucosEXO中的酶在大肠杆菌中表达，带有His标签，分子量为87 kDa和64 kDa。FucosEXO在天然条件下水解糖蛋白上的岩藻糖，在6至8的pH值范围内显示出高活性，无需辅助因子或添加剂。1. 用于方法开发的灵活格式；2. 可以结合酶以提高效率；3. 适用于自动化工作流程；4.即用型 - 只需加水即可。Genovis的FucosEXO 是 α-岩藻糖苷酶的混合物，用于在 N-和 O-糖基化蛋白或游离寡糖上有效水解 α1-2、α1-3 和 α1-4-连接的岩藻糖。人血清中 O-糖蛋白的富集：GlycOCATCH还可用于从复杂的样品混合物（如人血清）中选择性富集O-糖基化蛋白。简而言之，用Genovis的SialEXO处理血清并应用于GlycOCATCH树脂。洗涤树脂，用8M尿素洗脱O-糖基化蛋白。用胰蛋白酶消化样品并使用 RP-LC-MS/MS 进行分析，并使用 Swiss Prot 数据库鉴定蛋白质列表。O-糖基化蛋白以黄色表示。

Genovis的SialEXO Immobilized是一种微离心柱，用于在室温下孵育30分钟后完全去除0.5mg天然糖蛋白上的唾液酸。为了研究依那西普的潜在电荷变体，开发了一种使用SialEXO固定化柱对糖蛋白进行去唾液酸化的一般工作流程。毛细管电泳通常用于在生物制剂的表征和质量控制过程中确定电荷变体。使用SialEXO Imfixedized对糖蛋白进行去唾液酸化，并使用ProteinSimple的Maurice在成像等电聚焦中进行分析。综合起来，该分析工作流程改进了糖蛋白的分离并实现了电荷异构体分析。依那西普，如果不首先去除唾液酸，将很难分析，但使用SialEXO固定化分离峰可以获得。ImpaRATOR 来源于铜绿假单胞菌，在大肠杆菌中表达。该酶含有 His 标签，分子量为 97 kDa。

genvois的OpeRATOR 是一种内切蛋白酶，可催化直接靠近 O-聚糖的天然粘蛋白型 O-糖基化蛋白的肽键的水解。内切蛋白酶具有高特异性，可消化丝氨酸或苏氨酸残基的O-聚糖N端的蛋白质。 OpeRATOR 活性需要粘蛋白型的 O-聚糖，并且该酶不会用 N-连接聚糖消化糖蛋白。该酶对具有亚洲化he心1 O-聚糖的位点z活跃。它还消化唾液酸化的he心 1 和he心 3，但程度要低得多。为了获得z佳性能，需要去除唾液酸，因此，SialEXO冻干（唾液酸酶混合物）包含在购买中。 实现 O-糖谱分析、位点占用测定和 O-糖肽图谱以及使用 LC-MS 分析的中级方法。北京用于自动化系统的96孔板形式PNGaseF去糖基化酶

FucosEXO从一组dai表不同键的不同寡糖底物中释放的岩藻糖。FucosEXO对α1-6连接的岩藻糖残基没有活性。北京用于自动化系统的96孔板形式PNGaseF去糖基化酶

使用Genovis的GalNAcEXO 对 O-糖基化生物制药进行 Tn 抗原表征：未成熟的截短O-聚糖导致了复杂生物制药的异质性，使其分析更具挑战性。 O-聚糖的he心由n-α-GalNAc残基组成，通过糖苷键与丝氨酸或苏氨酸连接，称为Tn抗原。 现在，使用GalNAcEXO可以采用合适的酶策略来去除这些GalNAc并简化生物制药的表征。在质谱图中可以观察到重复峰的模式。其次，在与GalNAcEXO酶孵育后，剩余的GalNAc残基被完全去除，留下一个峰。因此，该工作流程确认了 O-糖基化生物制药上存在 Tn 抗原，并允许定量he心 GalNAc 水平。这种工作流程的另一个好处是减少了剩余的异质性，这有助于确认蛋白质的完整质量，并揭示截短的片段。北京用于自动化系统的96孔板形式PNGaseF去糖基化酶