荧光寿命成像技术（Fluorescence Lifetime ImagingMicroscopy，FLIM）是一种在显微尺度下展现荧光寿命空间分布的技术，由于其不受样品浓度影响，具有其他荧光成像技术无法代替的优异性能，目前在生物医学工程、光电半导体材料等领域是一种重要的表征测量手段。荧光和荧光寿命：分子包含多个单能态S0、S1、S2…和三重态T1…，每个能态都包含多个精细的能级。正常情况下，大部分电子处在*低能态即基态S0 的*低能级上，当分子被光束照射，会吸收光子能量，电子被激发到更高的能态S1 或S2 上，在S2 能态上的电子只能存在很短暂的时间，便会通过内转换过程跃迁到S1 上，而S1 能态上的电子亦会在极短时间内跃迁到S1 的*低能级上，而这些电子会存在一段时间后通过震荡弛豫辐射跃迁到基态，这个过程会释放一个光子，即荧光。此外，亦会有电子跃迁至三重态T1 上，再由T1 跃迁至基态，我们称之为磷光。荧光寿命成像的应用领域有哪些？深圳单分子荧光寿命成像供应
荧光寿命成像的优势是什么？荧光寿命成像具有不同于荧光强度成像的众多优点；不需要考虑跳色的影响，从而免去了计算和去除跳色杂质信号的麻烦；去除跳色杂质的准确性很大程度上依赖于信噪比、成像流程的设计和控制、以及跳色信号估算的算法，这些因素使得通过稳态光强度测量荧光寿命成像的精确度在很多时候受到质疑。稳态光强度的荧光寿命成像测量很容易受荧光标记光漂白或是激发光散射背景的影响,而这些因素对FLIM-FRET的测量影响相对较低。荧光寿命成像可以定量的区分参与FRET和没有参与FRET的分子数量，这样深入的定量分析是稳态光强度方法做不到的。深圳单分子荧光寿命成像供应荧光寿命成像系统是一种用于化学领域的分析仪器。
荧光显微技术具有无损、非接触、高特异性、高灵敏、高体友好以及能够提供功能信息等突出优点，一直是生命科学，尤其是细胞生物学研究的重要工具。近年来，随着生命科学的发展，对荧光显微技术也提出了越来越高的要求，激光技术、荧光探针标记技术、新型荧光探测技术和成像手段的不断发展，极大地促进了荧光显微技术的发展，成为推动生命科学发展的重要动力。此外，荧光显微技术也在成像的对比机制方面获得了很大的进展。超分辨(SR)成像技术的发展，也为荧光寿命成像(FLIM)的新发展提供了巨大的机遇。
分子的荧光寿命在几纳秒至几百纳秒之间，因此，测量荧光寿命成像需要极快响应时间的探测器。如今主要存在两类方案：一是时域测量，由一束窄脉冲将荧光分子激发至较高能态S1，接着测量荧光的发射几率随时间的变化。典型的时域测量方法有TCSPC和时间门（TG）两种。TCSPC利用快速秒表测量激发脉冲与探测荧光之间的时间差。使用高重复脉冲激发光激发样品，在每一个脉冲周期内，较多激发荧光分子发出一个光子，然后记录光子出现的时刻，并在该时刻记录一个光子，再下一个脉冲周期内也是相同的情况，经过多次计数可以得到荧光光子随时间的分布曲线。相似的，TG则探测不同时间窗口内的荧光强度，通过曲线拟合得到荧光寿命。二是频域测量，对连续激发光进行振幅调制后，分子发出的荧光强度也会受到振幅调制，两个调制信号之间存在与荧光寿命相关的相位差，因此可以测量该相位差计算荧光寿命。影响荧光寿命成像测量的因素有哪些？
荧光寿命成像可以在体现荧光物质形貌信息之外，还能够灵敏地反应荧光基团生化特性以及周围微环境的变化情况。将荧光寿命成像与共聚焦成像技术结合起来，实现人体三维荧光寿命成像，进一步实现人体三维功能成像奠定基础，有潜力应用于瘤识别，病变诊断等领域。荧光寿命是荧光基团在通过发射荧光光子返回基态之前在其激发态下保持平均多长时间的量度。不同荧光基团激发态停时间不同，大多数生物荧光素的荧光寿命时间在 0.2 - 20 ns。荧光寿命检测经典方法为点对点的时间相关单光子计数（TCSPC），但由于过去检测硬件的局限和复杂的使用而没有被普遍地应用于科学研究。随着技术的发展，在显微镜视野内进行超快速全像素荧光寿命信号采集的荧光寿命成像成为可能。荧光寿命成像能够灵敏地反应荧光基团生化特性以及周围微环境的变化情况。深圳单分子荧光寿命成像供应
荧光寿命成像和生物发光的不同之处是什么？深圳单分子荧光寿命成像供应
荧光寿命取决于荧光分子所处的微环境，通过对样品荧光寿命的测量和成像可以定量获取样品的功能信息。荧光分子受激发后发光，荧光寿命量化了发光的衰减率。该特征时间不但取决于特定的荧光团，还取决于其环境，分子相互作用影响弛豫过程并改变荧光团的寿命。荧光寿命是微环境的相对参数，不受环境吸收、样本浓度等因素影响，因此能够对生物组织环境中的 p H 值水平、离子浓度、氧分子浓度等微环境状态进行高精度检测。荧光寿命显微成像（FLIM），可以定位不同的分子及浓度分布，在生物，材料，半导体领域具有重要的应用价值。深圳单分子荧光寿命成像供应
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