广东组织扫描电镜推荐

**常见的扫描电子显微镜模式是检测由电子束激发的原子发射的二次电子（secondary electron）。可以检测的二次电子的数量，取决于样品测绘学形貌，以及取决于其他因素。通过扫描样品并使用特殊检测器收集被发射的二次电子，创建了显示表面的形貌的图像。它还可能产生样品表面的高分辨率图像，且图像呈三维，鉴定样品的表面结构。扫描电子显微镜由三大部分组成：真空系统，电子束系统以及成像系统。真空系统主要包括真空泵和真空柱两部分。真空柱是一个密封的柱形容器。扫描电子显微镜由三大部分组成：真空系统，电子束系统以及成像系统。广东组织扫描电镜推荐

扫描电子显微镜中样本必须在真空中观察，因此无法观察活样本。在处理样本时可能会产生样本本来没有的结构，这加剧了此后分析图像的难度。由于透射电子显微镜只能观察非常薄的样本，而有可能物质表面的结构与物质内部的结构不同。此外电子束可能通过碰撞和加热破坏样本。还有，电子显微镜观察到的样本都是没有颜色的。 现在的比较新技术可以在电子显微镜中观察湿的样本和不涂导电层的样本（环境扫描电子显微镜，Environmental Scanning Electron Microscopes，ESEM）。假如事先对样本的情况比较清晰的话则可以基本上进行不破坏的观察。广东组织扫描电镜推荐扫描电镜观察厚试样：其在观察厚试样时，能得到高的分辨率和比较真实的形貌。

扫描电镜以观察样品的表面形态为主。扫描电镜样品的制备，必须满足以下要求： 　　①保持完好的组织和细胞形态; 　　②充分暴露欲观察的部位; 　　③良好的导电性和较高的二次电子产额; 　　④保持充分干燥的状态。 　　某些含水量低且不易变形的生物材料，可以不经固定和干燥而在较低加速电压下直接观察，如动物毛发、昆虫、植物种子、花粉等，但图像质量差，而且观察和拍摄照片时须尽可能迅速。对大多数的生物材料，则应首先采用化学或物理方法固定、脱水和干燥，然后喷镀碳与金属以提高材料的导电性和二次电子产额。扫描电镜生物样品制备技术 常规扫描电镜对样品要求:必须是干燥的，不含水分或挥发性物质;具有一定机械强度,能耐受电子束轰击；具有导电性，被激发时能够产生足够的二次电子。生物材料特点:含水分多，质地柔软，机械强度小;组成元素的原子序数低，导电性差,激发后二次电子的产额较少。制样的任务:通过一系列处理,既要尽量完美地保存材料的固有形态，又要改良其物理性能，使其适合在电镜下观察成像 以下即为步骤方法、所需注意项目、以及操作中的使用技巧。

扫描电镜在追求高分辨率、高图像质量发展的同时，也向复合型发展，即成为把扫描、透射及微区成分分析、电子背散射衍射等结合为一体的复合型电镜，实现了表面形貌、微区成分和晶体结构等多信息同位分析。近几年随着计算机、信息数字化技术的发展和在扫描电镜上的应用，使得扫描电镜的各种性能发生了新的飞跃，操作更加快捷，使用更加方便，是科学研究及至工业生产等许多领域应用较为为普遍的显微分析仪器之一。扫描电镜的制造是依据电子与物质的相互作用。当一束高能的入射电子轰击物质表面时，被激发的区域将产生二次电子、俄歇电子、特征X射线和连续谱X射线、背散射电子、透射电子，以及在可见、紫外、红外光区域产生的电磁辐射。同时，也可产生电子-空穴对、晶格振动 (声子)、电子振荡。 由于扫描电镜入射电子与样品之间的相互作用，各个方向发射的二次电子收集起来。

SEM扫描电镜样品的制备过程如下：①取材 根据需要，切取适当大小的样品。专门的SEM备有灵活可动，范围较大的样品台，样品可大些。装在透射电镜上的扫描附件，活动范围较小，样品直径应在3～4mm左右。②漂洗 用缓冲液把组织表面洗净，否则会影响正常形态，但以快速和轻巧为宜，尽量保护组织或组织的表面结构，使其不致因不慎的操作造成人为损伤。③固定 用25～5％戊二醛固定30分钟或更长时间。Boyde建议用戊二醛固定几天到几个月，这样会增加组织的韧性，减少脱水造成的萎缩。④漂洗 用缓冲液洗3次，洗去未结合的戊二醛。⑤重固定 1％锇酸固定1～2小时。⑥漂洗 用缓冲液洗去未结合的锇酸。⑦脱水 用30％、50％、70％、80％、90％、95％、100％、100％acetone或乙醇溶液各10分钟，大于1mm的样品可脱水10～20分钟。⑧干燥 一般情况下，可把脱水后的样品放在空气中自然干燥或45℃热风吹干。有些研究工作要求尽量完好保存样品表面的精细结构，可用真空干燥法、冷冻干燥法和临界点干燥法等使样品干燥。这些方法都比空气干燥法效果好，其中临界点干燥法优点多，多被研究工作者采用。　扫描电子显微镜正是根据上述不同信息产生的机理，采用不同的信息检测器，使选择检测得以实现。广东组织扫描电镜推荐

扫描电镜生物样品：蛋白、细胞及DNA等样品，请提供详细的制样过程，减少盐对测试结果的影响。广东组织扫描电镜推荐

扫描电镜成像系统。电子经过一系列电磁透镜成束后，打到样品上与样品相互作用，会产生次级电子、背散射电子、俄歇电子以及X射线等一系列信号。所以需要不同的探测器譬如次级电子探测器、X射线能谱分析仪等来区分这些信号以获得所需要的信息。虽然X射线信号不能用于成像，但习惯上，仍然将X射线分析系统划分到成像系统中。 有些探测器造价昂贵，比如Robinsons式背散射电子探测器，这时，可以使用次级电子探测器代替，但需要设定一个偏压电场以筛除次级电子。广东组织扫描电镜推荐

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