髓鞘染色液(固绿法)

用液体试剂时要注意什么？在试管里进行某些实验时，取试剂不需要准确用量，只要学会估计取用液体的量即可。例如用滴管取用液体，lmL相当多少滴，5mL液体占一个试管容量的几分之几等。倒入试管里溶液的量，一般不超过其容积的1/3。定量取用液体时，用量筒或移液管。量筒用于量度一定体积的液体，可根据需要选用不同容量的量筒。量取液体后读数时，要使视线与量筒内液体的弯月面的低处保持水平，偏高或偏低都会读不准而造成较大的误差。检测试剂盒控制洗刷量和洗刷次数的另一种方法是参与过量的洗刷液。髓鞘染色液(固绿法)

检测试剂盒以免疫学反应为根底，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体-聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行，每加入一种试剂孵育后，可通过洗刷除去剩余的游离反应物，从而确保试验结果的特异性与稳定性。运用双抗体夹心法测定标本水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入，再与HRP符号的抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，通过完全洗刷后加底物TMB显色。检测试剂盒TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，通过标准曲线核算样品的浓度。髓鞘染色液(固绿法)瓶上装有滴管的试剂瓶称作滴瓶。

弱酸-弱碱型缓冲溶液的构成与配制。这类缓冲溶液的组成为：弱酸+弱酸盐（即共轭碱）、弱碱+弱碱盐（即共轭酸）。常见的实例有：HAc-NaAc、HAc-NH4Ac（微酸性）、NH4Cl-NH3.这类缓冲溶液的实验室配制方法一般是根据溶液组成和浓度要求，直接称取或量取弱酸、弱酸盐溶液或弱碱、弱碱盐溶液来配制。其实，这类缓冲溶液还可以用强酸与弱碱、强碱与酸来配制，归纳起来，应该有三种配制方法：（1）弱酸+弱酸盐，弱碱+弱碱盐例如，HAc-NaAc、NH4Cl-NH3（2）弱酸（过量）+强碱（适量），弱碱（过量）+强酸（适量）例如，HAc（过量）-NaOH（适量）、NH3（过量）-HCl（适量）。这类缓冲溶液需要的共轭碱（NaAc）或共轭酸（NH4Cl）是通过反应后产生的。（3）弱酸盐（过量）+强酸（不足量）或弱碱盐（过量）+强碱（不足量）例如，NaAc（过量）+HCl（适量），NH4Cl（过量）+NaOH（适量）缓冲溶液需要的弱酸（HAc）或弱碱（NH3）则通过反应后产生。

试剂盒实验遇到复孔该怎么办。在设计复孔检查时，提出问题：是对同一个样品作两次稀释，再别离加到板上的两个孔，仍是只稀释一次，然后罗致两次别离加到两个孔？前者好像把稀释时的过错也考虑到了，但做出来的成果两个孔相关挺大的。在实验中设复孔，意图是为了削减本次实验的体系过错对实验数据带来的影响，所以应该用第二种，有条件的话复孔的数量能够添加，体系过错更小。选用后者。假定在实验室阶段，或许需求屡次稀释，然后将不同稀释次数的别离做复孔，以便检查稀释进程中带来的过错；假定同一次稀释的复孔一起的存在检测差异大，或许板的均一性存在必定问题（打扫操作因素）。假定不同稀释次数差异大，阐明稀释方法有问题。检测试剂盒准确度是测定值与实在值挨近的程度。

加药时间:由于基因转染到细胞内之后要一段时间才能表达出蛋白质。所以筛选不能太早；但是也不能太晚，因为转染了外源基因的细胞代谢负荷较大，增值较慢，时间长了就会被没有外源基因转入的细胞所淹没，终导致筛选不出阳性克隆，一般要在转染24小时之后才开始加G418筛选。随着细胞的代谢G418的浓度和活性都回下降，所以每3~5天都要更换一次含有G418的筛选液。这时药物浓度可以降至200ug/ml。培养液:加药筛选约6天左右，细胞会大量死亡，孔中只剩下的细胞。这时会出现两个问题：1.死亡的细胞会裂解释放出有害物质，导致那些有neo表达的阳性细胞死亡，即非选择性死亡。2.孔中细胞数目很少，细胞之间的信号会变得很弱，也会导致阳性细胞的状态不佳甚至死亡。这个时候需要一种特殊的培养液：假如你要转染3T3细胞，在3T3细胞汇合度达到80%的时候，换液，培养过夜之后收集培养液，通过滤器消毒，和新鲜的培养液按1：1混合备用。再转染后筛选过程中就可以应用这种培养基。pH缓冲溶液有何用途：用以检定pH计的准确性。髓鞘染色液(固绿法)

配制ph计的3mol/L的KCL溶液 ph计的ph电极在使用前都是被护套里的保护液保护着。髓鞘染色液(固绿法)

利福平在血液中75％～80％与血浆白蛋白结合，在组织分布普遍，易渗入机体组织、体液（包括脑脊液）中。利福平在肝脏代谢，代谢物主要是脱乙酰利福平。体内药物多自胆汁中排泄，约1／3药物由尿中排泄。利福平的代谢产物呈橘红色，因而尿、粪便、唾液、眼泪和汗等也带红色。利福平对肝脏有毒性作用，可致肝酶、胆红素升高。该品可加速异烟册代谢为乙酰胺而加强肝毒性。原有肝病者更易引起肝损害，当肝储备功能已经严重受损时服用利福平可致死亡。利福平偶可致血细胞改变及肾脏损害。部分患者服用后产生胃肠道反应，少数患者对利福平过敏，利福平与其他之间无交叉过敏反应。髓鞘染色液(固绿法)

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