流加质量百分比浓度为20%的葡萄糖维持残糖不低于%,流加消泡剂消泡。实施例2一种优化的谷氨酸发酵培养基,其包括发酵培养基a和发酵培养基b;所述发酵培养基a首先添加,然后间隔24h添加发酵培养基b。所述发酵培养基a的制备方法为:取各原料:葡萄糖100g/l,酵母浸膏25g/l,k2hpo41g/l,mgso4·7h2o70mg/l,2-羟基乙胺20mg/l,cecl35mg/l,mnso4·h2o2mg/l,feso4·7h2o2mg/l,vb15mg/l,生物素5μg/l;将各原料搅拌均匀后,调节ph为,121℃**15min,自然冷却,制得发酵培养基a;所述发酵培养基b的制备方法为:取各原料:琥珀酸7g/l,尿素2g/l,壳聚糖50mg/l;将各原料搅拌均匀后,调节ph为,121℃**15min,自然冷却,制得发酵培养基b;采用常规发酵工艺:将黄色短杆菌gdk-9按8%接种量将种子液(od600nm为)接入装有60l发酵培养基a的100l发酵罐中进行发酵培养,发酵培养24h,然后添加10l发酵培养基b,继续发酵培养24h,收集发酵液;整个发酵培养过程中,控制发酵温度35℃,通风比1∶,搅拌转速300r/min,溶氧维持在20%,流加质量百分比浓度为20%的葡萄糖维持残糖不低于%,流加消泡剂消泡。实施例3一、cecl3稀土盐对菌体浓度、谷氨酸含量以及糖酸转化率的影响。MEM培养基在细胞培养中表现出高效的稳定性。安徽DMEM高糖培养基供应商
c、结果为:在用未调ph液体培养基进行培养时,整体长势从优至弱分别为1/2cs未调ph液体培养基、cs未调ph液体培养基、1/2ms未调ph液体培养基、ms未调ph液体培养基;在用ph调至,整体长势从优至弱分别为1/、、1/、;不论是否调ph至,cs液体培养基培养的马铃薯幼苗长势均优于ms液体培养基;不论是否调ph至,1/2cs液体培养基培养的马铃薯幼苗长势均优于1/2ms液体培养基。如图9和图10所示。说明,1/2cs液体培养基和cs液体培养基应用于植物水培时,不论是否调节ph至,均能获得很好的培养效果,克服了传统液体培养基必须调节ph后才适用于植物水培的缺点。**后说明的是,以上实施例*用以说明本发明的技术方案而非限制,尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明,本领域的普通技术人员应当理解,可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换,而其不脱离本发明技术方案的宗旨和范围,则均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。安徽DMEM高糖培养基供应商减血清培养基提高了实验结果的可靠性。
附图说明图1是1/2cs和1/2ms两种培养基上,哥伦比亚型拟南芥无菌苗培养的对比效果图,a:无菌苗在培养基中生长情况;b:无菌苗莲座叶及根系发育;c:萌发率;d主根长度;a和b中bar=;图2是1/2cs和1/2ms两种培养基上,兰兹贝格型拟南芥无菌植株培养的对比效果图,a:无菌植株在培养基中生长情况;b:无菌植株地上部分及根系发育;c:无菌植株花***发育(左)和花粉的亚历山大染色(右);d:主根长度;e:株高;f:莲座叶长度;g:成熟花粉活力;a中bar=、b中bar=、c中花***bar=、c中花粉bar=15um;图3是1/2cs和1/2ms两种培养基上,油菜无菌苗培养的对比效果图,a:无菌植株在培养基中生长情况;b:无菌苗地上部分及根系发育;c:茎高;d:茎中粗;e:主根长;f:大于;a中bar=、b中bar=;图4是1/2cs和1/2ms两种培养基上,马铃薯无菌苗培养的对比效果图,a:无菌植株在培养基中生长情况;b:无菌苗地上部分及根系发育;c:茎高;d:茎中粗;e:根数;a和b中bar=;图5是cs和ms两种培养基上,哥伦比亚型拟南芥叶片及根愈伤**诱导的对比效果图,a:叶片愈伤**;b:叶片愈伤**诱导率;c:根愈伤**;d:根愈伤**诱导率;a和c中bar=;图6是cs和ms两种培养基上。
培养实例7和对比培养例7的诱导结果比较::用上述方法进行水稻成熟胚愈伤**诱导时,cs诱导培养基与ms诱导培养基诱导出的愈伤**形态大小均相近,出愈率均为100%。如图7所示。培养实例8:液体培养基在植物水培中的应用(1)用不同ph的超纯水配制的液体培养基ph值稳定性比较:a、用不同ph的超纯水配制液体培养基:通常多种因素会导致相同超纯水制水机产出的超纯水ph变动较大,ph通常为。分别选取ph为、、、、、,分别配制ms液体培养基、cs液体培养基、1/2ms液体培养基、1/2cs液体培养基,制作方法为:ms液体培养基为取ms基本培养基置于不同ph的超纯水中溶解并定容至1l;cs液体培养基为取cs基本培养基置于不同ph的超纯水中溶解并定容至1l;1/2ms液体培养基为取1/2ms基本培养基置于不同ph的超纯水中溶解并定容至1l;1/2cs液体培养基为取1/2cs基本培养基置于不同ph的超纯水中溶解并定容至1l。b、结果为:用ph为,ms液体培养基ph为,cs液体培养基ph为,1/2ms液体培养基ph为,1/2cs液体培养基ph为。植物**适宜生长的ph一般为,观察可知,ms液体培养基及1/2ms液体培养基的ph偏酸性且波动较大,其应用于液体培养基时通常需要调节ph,过程繁琐,相比之下。DMEM培养基在实验室中广泛应用于细胞实验。
但酚红在无血清细胞培养基中可能带来胞内钠/钾失衡,影响细胞生长。碳酸氢钠在细胞培养基中主要是作为缓冲系统,此外还具有调节渗透压的作用。通常产品使用说明中的碳酸氢钠推荐量是一个标准、安全量,是在科学的基础上根据实践经验所得。但是由于不同的细胞系(株)不同,同一株细胞适应环境也可能不同(细胞耐受性不同等),且存在的地域性水质差异等,在实际生产过程中也可稍作改动,但使用者需做相应的检测(理化及细胞生产试验等)。HEPES是一种非离子缓冲液,在pH~,在高浓度时对一些细胞可能**。HEPES缓冲液可与低水平的碳酸钠(g/L)共用,以抵消因额外加入HEPES引起的渗透压增加。其安全浓度范围是10~25mmol/L。**酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源,尽管细胞更倾向于以葡萄糖作为碳源,但是在没有葡萄糖的条件下,细胞也可以代谢**酸钠。谷氨酰胺在溶液中很不稳定,4℃下放置1周可分解50%,使用中**好单独配制,置-20℃冰箱中保存,使用前加入细胞培养液中。无酚红培养基在实验中减少了潜在毒性。安徽DMEM高糖培养基供应商
F12培养基在细胞分化研究中表现优越。安徽DMEM高糖培养基供应商
**早开发的基础培养基(minimalessentialmedium,MEM),其本质为含有盐、氨基酸、维生素和其他必需营养物的pH缓冲的等渗混合物。在此基础上,DMEM、IMDM、HAMF12、PRMI1640等各种合成细胞培养基被不断开发出来。常用合成培养基的配方此处不详细介绍,其特性及应用的范围见表1-2。表1-2常用合成培养基的特性及应用的范围培养基名称特性及应用范围199细胞培养基添加适量的血清后,可***用于多种细胞培养,并用于**学、*苗生产等。MEM细胞培养基MEM(MinimalEssentialMedium)培养基有含Earle's平衡盐的类型,也有含Hanks'平衡盐的类型;有高压**型的,也有过滤**型的;还有含非必需氨基酸的类型。是**基本、适用范围**广的细胞培养基。DMEM细胞培养基DMEM(Dulbecco’smodifiedMinimalEssentialMedium)是由Dulbecco在MEM培养基的基础上改良获得的,各成分份量加倍,分低糖(1000mg/L)、高糖(4500mg/L)两种类型。细胞生长快。附着稍差的肿*细胞、克隆培养用高糖效果较好,常用于杂交*的骨髓*细胞和DNA转染的转化细胞培养。IMDM细胞培养基IMDM(Iscove’smodifiedDMEM)是由Iscove在DMEM基础上改良,增加了几种氨基酸和胱氨酸量等。可用于杂交*细胞培养。安徽DMEM高糖培养基供应商