蛋白质浓缩和替代缓冲液常用的超滤管,微孔(mwco10kd)常用的micon-ultra-15超滤管。根据靶蛋白的分子量、浓缩前的体积和浓缩的靶体积,还可提供不同尺寸和尺寸的其他类型的mwco超滤管。它可以重复使用。1。选择合适的超滤管主要考虑分子量和浓度。通常靶蛋白的分子量不应大于靶蛋白分子量的1/3。例如,当靶蛋白的分子量为35kDa时,可以选择靶蛋白分子量为10kDa的超滤管。如果靶蛋白的分子量约为10kd,则可使用分子量为3kd的超滤管。2。新购买的超滤是干燥的。使用前加入Milliq水。水的体积完全覆盖在膜上,冰浴或冰箱被预先冷却几分钟。倒出水后,可以加入蛋白质溶液。蛋白质添加量不超过管顶白线。超滤管在加入蛋白质溶液前需要在冰上预先冷却。三。平衡。超滤离心管可用于制备纯度高的蛋白质,以进行晶体结构解析或其他实验室操作。广州浓缩超滤离心管在哪买
当浓缩到剩下1ml时,取50ul缓冲溶液,加入10ul流穿,看有没变蓝色,以此判断超滤管是否漏掉蛋白。如果管漏了,将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。要精确判断是否漏管,用5mgml的BSA离心10min,再取流穿,跑蛋白胶或Bradford粗测,继续加入剩下的蛋白液浓缩(在冰上操作,防止蛋白受热),直到所有浓缩液都加完为止。离心过程中注意是否发生蛋白沉淀,导致堵管。若发生沉淀,要确定沉淀的具体原因,是蛋白浓度过高还是Buffer不合适;前者可用多根超滤管同时超滤,降低浓度的办法解决,后者的方法是换不同的缓冲溶液,直到蛋白不发生沉淀为止。广州浓缩超滤离心管在哪买超滤离心管还可用于检测生物医学样本中的微生物、疾病细胞等,并进行诊断和缓解。
离心超滤装置用于浓缩和澄清过滤生物样品,蛋白纯化,颗粒物去除,血浆或血清过滤,以及从细胞裂解液或细胞培养上清去除细胞或细胞碎片。提供一系列离心设备,快速安全处理100 μl到100ml样品。可选抛弃型和可重复使用超滤装置。超滤离心浓缩管,用于生物样品浓缩。离心超滤管,简单快速,一步离心完成样品浓缩,起始样品体积可达500μl。可放入2.2ml角转子离心。垂直膜配合狭长的流道,有效地避免滤膜堵塞,提高浓缩速度,即使颗粒含量高的溶液,也同样能达到快速浓缩。在30分钟内就可达到超过90%的浓缩回收率。死端结构避免离心干燥样品。0.5ml-20ml样品处理量的超滤管,截留分子量2KDa-100KDa,规格齐全,浓缩回收率高、流速更快,较高达12000g的高速离心机,机械强度更好,质量更好,价格更优惠。
避免过度浓缩,体积越小,越容易因表面吸附而损失得率。离心后用Tips轻轻吹吸几次滤膜截留的溶液,必要时补加一定体积的缓冲液冲洗膜表面,有助于减少膜表面吸附,能提高回收率。尽量避免Tips接触膜表面。离心管是一个简单的可以承受高转速压力的管子,比如离一些样品,分离出上清沉淀。超滤离心管会有一个类似于内管和外管的两个部分,内管中是带有一定分子量的膜,当高速离心时,分子量比它小的就漏到下面的管子(即外管)中了,分子量比它大的就截留在上面(即内管中),就是超滤的原理.常用于浓缩样品。 超滤离心管通常不需要预处理即可使用,不过对于蛋白质样本处理,特别是较稀的蛋白质溶液来说(<10ug/mL),用超滤膜浓缩回收率常常是不定量的。使用超滤离心管时,应注意保持样品干燥、无污染和清洁。
A(聚酰胺):这种材质是PP和PE材质的聚合物,半透明,化学性质非常稳定,单不耐高温。PF(聚氟):半透明,可以低温使用,如果是-100℃-140℃下的实验环境,就可以用这种材质的离心管。CAB(醋酸丁酯纤维素):透明,可用于较稀的酸、碱、盐,以及酒精、蔗糖的梯度测定。PS(聚苯乙烯):透明,硬度大,对大多数的水溶液稳定,但是会被多种有机物腐蚀,多用于低速离心,而且一般是一次性使用。离心管分类:按材质可分:塑料离心管、玻璃离心管和不锈钢离心管等。按速度可分:低速离心管和高速离心管。按容量可分:微量离心管、小容量离心管和大容量离心管。一般称容量大于100mL的离心管为离心瓶。超滤离心管可以根据不同孔径大小选择超滤膜,以便过滤出所需大小范围内的目标分子。广州浓缩超滤离心管在哪买
超滤离心管还可以用于分离和提取植物中的活性成分和化合物。广州浓缩超滤离心管在哪买
超滤离心管从细胞培养上清液中浓缩蛋白,在园子里找到一些关于浓缩蛋白的一些帖子,但还有些问题还是向园子里的大虾请教一下。我们定的是 15ml规格的管子,不知道有没有谁以前做过的,有关于转速,时间给一些建议,另外细胞上清液离心前是否需要什么预处理?离心之后回收蛋白时怎么尽量减少损失?如果要把管子重复利用,NaoH清洗后,如何在20%的乙醇中保存?是将其浸到乙醇中防于4度,还是在管子中灌入乙醇?我用过5ml的管子,当时使用的转速是4000rpm 8min,可以把5ml的样品液浓缩到约200ul,这只供参考,具体情况还要由您的样品决定。我保存5ml管子的方法是把内管取出,浸泡于装有20%乙醇的烧杯中。四度保存。广州浓缩超滤离心管在哪买
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