蛋白质浓缩和替代缓冲液常用的超滤管,微孔(mwco10kd)常用的micon-ultra-15超滤管。根据靶蛋白的分子量、浓缩前的体积和浓缩的靶体积,还可提供不同尺寸和尺寸的其他类型的mwco超滤管。它可以重复使用。1。选择合适的超滤管主要考虑分子量和浓度。通常靶蛋白的分子量不应大于靶蛋白分子量的1/3。例如,当靶蛋白的分子量为35kDa时,可以选择靶蛋白分子量为10kDa的超滤管。如果靶蛋白的分子量约为10kd,则可使用分子量为3kd的超滤管。2。新购买的超滤是干燥的。使用前加入Milliq水。水的体积完全覆盖在膜上,冰浴或冰箱被预先冷却几分钟。倒出水后,可以加入蛋白质溶液。蛋白质添加量不超过管顶白线。超滤管在加入蛋白质溶液前需要在冰上预先冷却。三。平衡。超滤离心管可以根据不同孔径大小选择超滤膜,以便过滤出所需大小范围内的目标分子。山东再生纤维素离心管报价
超滤离心管的常见问题与解答,一:超滤离心管的膜材质是什么?超滤离心管的膜材质为特有的Ultracel再生纤维素膜,生产工艺严格,截留分子量明确而,蛋白吸附损失较小。二:如果要用超滤离心管的方法分离两种蛋白,那么这两个蛋白的大小需要相差多少?按照经验,建议两个蛋白的分子量要相差一个数量级(10倍)。不保证超滤离心管不包含RNA酶,建议用0.1%DEPC在37度浸泡2小时,以完全灭活RNA酶;残留的DEPC可以用Milli-Q超纯水洗涤除去。去污剂因其独特的性质,当浓度大于临界微团浓度(Critical Micelle Concentration、CMC)时,去污剂分子会聚集形成微团而改变分子构象,这有可能会影响去污剂的去除效果,具体的操作步骤请垂询我们。山东再生纤维素离心管报价超滤离心管也可用于免疫学研究和诊断,如T细胞启用、细胞因子分析等。
超滤管,即超滤离心管,是生物、化学实验室非常重要的分离装置。超滤管可以去除蛋白质及大分子杂质,经常用于蛋白浓缩和更换缓冲液的操作,超滤是实验室常用的分离技术,是一种加压膜分离技术,膜孔径介于微滤和反渗透之间,通过膜表面的微孔结构对物质进行选择性分离。在一定压力下,小分子物质可穿过一定孔径的特制薄膜,而大分子物质不能透过,从而将小分子与生物大分子分开,实现滤除微小固型颗粒物、大分子、病毒以及细菌等微生物的目的。超滤管一般由盖子、过滤器和离心管三个部分组成。超滤管具有快速超过滤功能,能够达到较高的浓缩系数,易于从稀释液或复杂的样本组合中进行浓缩液回收,其竖式设计以及可用的滤膜表面面积能够提供快速的样本处理速度和较高的样本回收率,并能进行80倍浓缩。
超滤作为一种膜分离技术,普遍应用于生物样品的浓缩、脱盐和缓冲液置换,其原理是样本在力的作用下,通过超滤膜孔径的筛滤,大分子量的颗粒被截留下来,而水、溶剂和低分子量溶质则允许透过膜,从而达到浓缩、脱盐和缓冲液置换的目的,这种方法较大的特点是操作简便、快速、高效,可同时浓缩和纯化分子,一般来说超滤的回收率能够达到90%以上,因此得到许多人的青睐。一种超滤离心管,包括主管,主管为顶部开口底部封闭结构,主管开口处安装有顶盖,主管内安装有内管,内管上下贯通,内管底面贴合有超滤膜,超滤膜将内管底面包覆,超滤膜底面贴合有支撑板,超滤膜位于内管底面与支撑板之间,内管底部安装有底托,内管配合底托将超滤膜、支撑板压紧,内管、超滤膜、支撑板、底托与主管中位于底托以下的容腔空间连通。超滤离心管也可用于海洋科学研究中,以检测水样中的微量元素和化合物。
超滤离心管使用注意事项:(1)选择合适的超滤管。通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量为35kDa,就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。若目的蛋白分子量为10kD左右,则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书,注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同。2)新买来的超滤是干燥的,使用前加入超纯水,水量完全过膜,冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超过管顶的白线为准。操作要轻,加入蛋白液前,超滤管需要插在冰上预冷。(3)平衡。质量和重心二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快,否则直接损坏超滤膜。开始离心超滤(离心机预冷至4度)。不同离心机的转速 rpm换算成g之后,有所不同。离心机的加速度调至较低档,减小对膜的压力。注意,一定要等离心机达到目的转速之后,方可离开离心机,否则离心机出问题时,无法一时间处理。膜与转轴的方向根据说明书调整(角转离心机的情况是膜与轴垂直)。在实际使用中,一般转速开的比说明书里的要低,这样可以延长离心管的使用寿命。超滤离心管也可用于从血浆或尿液中提取蛋白质和核酸等大分子化合物。山东再生纤维素离心管报价
使用超滤离心管时应注意避免与酸、碱等化学物质接触,以免损坏其结构和性能。山东再生纤维素离心管报价
超滤离心管是否可以重复使用:离心超滤管通常不能消毒再次性使用。由于单管价格并不便宜,不少人尝试重复使用----经验是用蒸馏水清洗膜表面多次,离心一次到两次,那种可以反向离心的小管子可以加蒸馏水浸泡后反向多离心一次,会好些。可重复用于同一样品,不用时可用蒸馏水浸泡,但是要防止细菌污染。不同样品就不要混用了。有人说泡在20%酒精、1N的NaOH(氢氧化钠)中,防止长菌,而且防干,只要超滤膜侵了水,就不可以再让它干,但也有人说会破坏膜结构。反正厂家一般不支持重复用。多次重复使用会堵塞滤膜上的孔径,甚至出现漏液现象,影响实验结果。山东再生纤维素离心管报价