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杀灭曲线的建立：通过建立杀灭曲线（剂量反应曲线），确定能够杀死未转染宿主细胞的较低浓度，从而筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株。建立杀灭曲线至少选择5个浓度。1、按照20-25%的细胞密度将未转化的细胞铺在合适的培养板上，37℃，CO2过夜培养（需要更高密度，可增加接种量）。2、根据细胞类型，设定合适的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。3、第2天换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基，每个浓度做三个平行孔。4、接下来每3-4天更换新的含药物培养基。5、按照每2天进行活细胞计数，来确定杀灭未转染细胞的恰当浓度。通常7-10天内能够杀死绝大多数细胞的较低浓度为筛选用的工作浓度。一般盐雾标准中要求试验过程中的盐雾收集液pH值在6.5~7.2之间。苯酚碱性品红溶液(5%/0.5%)

PAGE连续蛋白上样缓冲液，科研专门***科研实验中试剂取用应注意事项：1. 固体试剂的取用:取用固体药品时药匙必须是干净的.一支药匙不能同时取用两种或两种以上的试剂.药匙每取完一种试剂后都必须用干净的纸擦拭干净,以备下次使用.药匙的两端为大小两匙,取固体量较多时用大匙,较少时用小匙2. 取用不定量(较多)液体——直接倾倒a. 瓶塞必须倒放在桌面上【防止药品腐蚀实验台或污染药品】；b. 直接倾倒时瓶口必须紧挨试管口，试管45度，并且缓缓地倒【防止药液损失】；c. 贴标签的一面必须朝向手心处【防止药液洒出腐蚀标签】。苯酚碱性品红溶液(5%/0.5%)检测试剂盒将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。

溶故配制注意事项：1.药品要有较好的质皿试剂分为优级纯（保证试剂，Guaranteed reagent,G.R.)，分析试剂(Antalytical reagent, A. R.)化学纯(Chemical pure，C. P.)和实验试剂(Laboratory reagent, L. R.)等等。化学试剂，杂质较多。只在个别情况下应用。如配洗液用的硫酸、配干燥剂的氯化钙等。2.药品称且要精确。3.配制试剂用水应用新鲜的去离子水或双蒸馏水，比电闭值在50万欧姆以上，PH在5.5-7.0之间才可应用，在组织培养等特殊用途时应注意此顶要求。配制一般化9k用溶液只要求用双燕蒸馏水或去离子水.4.配好后的溶液，应立即除菌处理(如高压灭菌、抽滤或加抑菌物质),以防杂菌生长。

检测试剂盒冷冻后的质量会受损吗？检测试剂盒可以冷冻，但不能反复冻融，如果您在一周之内做实验，可以2-8℃保存。如果在一周至一个月之内做实验，可以-20℃保存。如果在一个月以上做实验，可以-80℃保存。但是值得注意的是，冻融一次比2-8℃保存损失更大，主要是因为蛋白的降解，冻融一次蛋白都有降解。检测试剂盒实验标本要求:标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。液体试剂是指药物分散在液体分散介质中组成的内服或外用的液态制剂。

BCA蛋白检测试剂盒是进行蛋白质浓度测定的常见的方法之一。BCA蛋白定量的主要原理是：蛋白质在碱性条件下，可以将二价Cu2+离子还原成一价Cu+离子。产生的一价Cu+离子可以与BCA（Bicinchoninicacid）试剂结合，终生成紫色的复合物。该复合物在562nm处有很强的吸收峰。复合物的多少与蛋白质的浓度呈接近的线性关系。BCA蛋白检测试剂盒有许多优点：检测的灵敏度高，检测的蛋白质浓度下限可达20μg/mL。线性范围广，在20-2000μg/mL的范围内，呈接近的线性关系。兼容性良好，产品可以兼容的化学物质非常普遍。检测试剂盒第二个影响洗刷作用的主要参数是洗刷循环的量。苯酚碱性品红溶液(5%/0.5%)

用无菌吸管吸掉上层血浆和血小板，不要碰到单个核细胞层。苯酚碱性品红溶液(5%/0.5%)

淋巴细胞分离液：淋巴细胞分离液是一种根据细胞密度差异，借助离心产生的重力加速度，进行细胞的分离纯化的常用试剂。常用的淋巴细胞分离液有Ficoll淋巴细胞分离液、Percoll淋巴细胞分离液。Ficoll与Percoll分离单个核细胞的方法均为密度梯度离心法。分离原理：外周血中单个核细胞和单核细胞,其体积、形态和密度与其他细胞不同，淋巴细胞分离液是一种密度介于1.075~1.090之间而近似于等渗的溶液,用它做密度梯度离心,使一定密度的细胞按相应密度梯度分布，从而将各种血细胞加以分离。淋巴细胞分离液Lymphocyte Separation Medium（human, Ficoll-Paque ）是世界范围内用于体外研究分离人淋巴细胞的实验室公认的标准。苯酚碱性品红溶液(5%/0.5%)