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检测试剂盒实验注意事项有哪些？正式试验时，应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件，待检样品应作一式二份，以保证实验结果的准确性。有时本底较高，说明有非特异性反应，可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。在实验中，进行各项实验条件的选择是很重要的，其中包括：固相载体的选择：许多物质可作为固相载体，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体，在使用前均可进行筛选：用等量抗原包被，在同一实验条件下进行反应，观察其显色反应是否均一性，据此判明其吸附性能是否良好。包被抗体（或抗原）的选择：将抗体（或抗原）吸附在固相载体表面时，要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0～9.6之间。吸附温度，时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18～24小时。蛋白质包被的浓度需进行滴定：即用不同的蛋白质浓度（0.1、1.0和10μg／ml等）进行包被后，在其它试验条件相同时，观察阳性标本的OD值。选择OD值大而蛋白量少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1～10μg／ml。pH缓冲溶液有何用途：pH测量前标定校准pH计。碱性琼脂糖凝胶电泳缓冲液(10×)

人外周血单核细胞（PBMC）分离：PBMC（peripheral blood mononuclear cell），外周血单个核细胞，顾名思义，其主要细胞类型为血液里边具有单个核的细胞，主要包括淋巴细胞（Ｔ/Ｂ），单核细胞，吞噬细胞，树突状细胞和其他少量细胞类型。其中淋巴细胞占很大一部分。分离ＰＢＭＣ的主要目的是为了将多核细胞和红细胞去除，收集单个核细胞，从而能够很方便地模拟体外的血液免疫环境。脐带血单个核细胞（MNC）分离脐血是指胎儿出生时脐带内及胎盘近胎儿一侧血管内的血液，含有丰富的干细胞和祖细胞，主要包含造血干细胞和间充质干细胞。脐血MNC能治好多种病种，包括：神经系统疾病，呼吸系统疾病，消化系统疾病，心脏疾病，内分泌疾病以及小儿脑瘫等。用于简便、高效地提取脐血单个核细胞。碱性琼脂糖凝胶电泳缓冲液(10×)固体试剂的取用:药匙每取完一种试剂后都必须用干净的纸擦拭干净。

配制ph计的3mol/L的KCL溶液 ph计的ph电极在使用前都是被护套里的保护液保护着，是为了保持其原有的ph电势平衡不变，为了测量时会更加精确。这里面就是PH电极的保护液，即 3mol/L的KCL溶液。所以要自己学会如何配置，使ph电极浸泡在保护液里，这样就能快速回复其活性，又能很好的测量了。配制ph计保护液——3mol/L的KCL溶液步骤： 1、计算：KCL摩尔质量74.5g/moL, 则KCL质量＝3mol×74.5g/mol=223.5g； 2、 称量：用分析天平称量KCL=223.5g，注意分析天平的使用； 3、 溶解：在烧杯中用100ml蒸馏水使之完全溶解，并用玻璃棒搅拌； 4、 转移，洗涤：把溶解好的溶液移入1000ml容量瓶，用容量瓶瓶口较细的。

液体培养基接种向肉膏蛋白胨液体培养基中接种少量菌体时，其操作步骤基本与斜面接种时相同，不同之处是挑取菌体的接种环放入液体培养基后，应在液体表面处的管内壁上轻轻磨擦，使菌体从环上脱落，混进液体培养基，塞好试管塞后，摇动液体，使菌体在液体中分布均匀，或用试管振荡器混匀。向液体培养基中接种量大或要求定量接种时，可将无菌水或液体培养基注入菌种试管，用接种环将菌苔刮下，再将菌种悬液以无菌吸管定量吸出加入，或直接倒入液体培养基。如果菌种为液体培养物，则可用无菌吸管定量吸出加入或直接倒入液体培养基。整个接种过程都要求无菌操作。液体培养基接种向肉膏蛋白胨液体培养基中接种少量菌体时，其操作步骤基本与斜面接种时相同。

检测试剂盒标本保存方法：标本管中增加物质的影响。抗凝剂、酶抑制剂及快速分别血清的分别胶等均对测定有必定烦扰作用。标本溶血。由于各种人为原因引起的标本溶血，均可因红细胞破坏溶解时释放出很多具有过氧化物酶活性的血红蛋白，在以辣根过氧化物酶为符号的测定中，会导致非特异性显色，检测试剂盒烦扰测定作用。为打败上述烦扰作用，标本搜集时有必要留意避免溶血。标本保存不妥。 在冰箱中保存过久的标本，血清中IgG可聚组成多聚体、AFP可构成二聚体，在间接法测定中会导致本底过深、乃至形成假阳性；标本放置时刻过长（如一日以上），有时抗原或抗体免疫活性削弱，亦可出现假阴性。为打败上述烦扰，测定的血清标本宜为新鲜搜集；如不能立即测定，5天内测定的血清标本可存放于4℃，1周后测定的血清标本应低温冻存；冻存后融解的标本，蛋白质部分浓缩，分布不均，应充沛混合后再测定，但混匀时应轻柔，不行激烈振荡。注意事项：尽注意无菌操作，避免污染。碱性琼脂糖凝胶电泳缓冲液(10×)

固体试剂的取用:取用固体药品时药匙必须是干净的。碱性琼脂糖凝胶电泳缓冲液(10×)

G418溶液是什么：G418(G418,G 418,G-418,Geneticin)是一种氨基糖苷类 ,这种氨基糖类的结构和新霉素、庆大霉素、卡那霉素相似，在分子遗传试验中,是稳定转染常用的抗性筛选试剂。它通过克制转座子Tn601，Tn5的基因,干扰核糖体功能而阻断蛋白质合成,对原核和真核等细胞产生东西,包括细菌、酵母、植物和哺乳动物细胞 ,也包括原生动物和蠕虫。当neo基因被整合进真核细胞DNA后 ,则能启动neo基因编码的序列转录为ｍＲＮＡ ,从而获得抗性产物氨基糖苷磷酸转移酶的表达 ,使细胞获得抗性而能在含有Ｇ418的选择性培养基中生长。Ｇ418的这一选择特性 ,已在基因转移、基因敲除、抗性筛选以及转基因动物等方面得以普遍应用。溶液配制：G418溶液配制时，一般溶于水配成50mg/ml的原液，使用时再稀释使用。在筛选菌类和藻类时，一般用5mg/l 的浓度或者更低。筛选哺乳动物细胞是大可400mg/l的浓度。碱性琼脂糖凝胶电泳缓冲液(10×)