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湖南琼脂灭菌 培养基制备器

来源: 发布时间:2024年09月11日

培养基的分装:培养基的分装,应按使用的目的和要求,分装于试管、烧瓶等适当容器内。分装量不得超过容器装盛量的2/3。容器口可用垫有防湿纸的棉塞封堵,其外还须用防水纸包扎(现试管一般多有用螺旋盖者)。分装时较好能使用半自动或电动的定量分装器。分装琼脂斜面培养基时,分装量应以能形成2/3底层和1/3斜面的量为洽当。分装容器应预先清洗干净并经干烤消毒,以利于培养基的彻底灭菌。每批培养基应另外分装20ml培养基于一小玻璃瓶中,随该批培养基同时灭菌,以为测定该批培养基较终pH之用。培养基成份的混合与溶化:培养基所用化学药品均应是化学纯的。湖南琼脂灭菌 培养基制备器

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培养基制备的基本方法:1、培养基配方的选定:同一种培养基的配方在不同著作中常会有某些差别。因此,除所用的是标准方法,应严格按其规定进行配制外,一般均应尽量收集有关资料,加以比较核对,再依据自己的使用目的,加以选用,记录其来源。2、培养基的制备记录:每次制备培养基均应有记录,包括培养基名称,配方及其来源,和各种成份的牌号,终pH值、消毒的温度和时间制备的日期和制备者等,记录应复制一份,原记录保存备查,复制记录随制好的培养基一同存放、以防发生混乱。湖南琼脂灭菌 培养基制备器培养基制备器使用注射器将添加剂加入,确保了添加剂的无菌添加。

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培养基配制:素:为防止培养时期细菌的污染,可在培养基中添加适当素,一般用量与组织细胞培养相同:卡那霉素100单位/毫升,或双抗--青霉素100单位/毫升,链霉素100微克/毫升。植物血凝素(PHA):非增殖期的细胞不能制备染色体,如人外周血淋巴细胞,但在离体培养过程中,在PHA的作用下,可被刺激转化为淋巴母细胞而进入有丝分裂。经实验测定其分裂高峰分别于培养后44-48小时和68-72小时。PHA有粘多糖,蛋白质两种重要成分。粘多糖促使有丝分裂,蛋白质起凝集作用。PHA的细胞数随其浓度而增加,直至全部免疫活性细胞均被为止,但PHA浓度过高会引起凝集,一般采用4%浓度为好。

根据培养基的用途来区分,可分为选择培养基、增殖培养基、鉴别培养基等。a.选择培养基在培养基中加入某种物质以杀死或压抑不需要的菌种生长的培养基,称之为选择培养基。如链霉素、氯霉素等压抑原核微生物的生长;而制霉菌素、灰黄霉素等能压抑真核微生物的生长;结晶紫能压抑革兰氏阳性细菌的生长等。b.增殖培养基在自然界中,不同种的微生物常生活在一起,为了分离我们所需要的微生物,在普通培养基中加入一些某种微生物特别喜欢的营养物质,以增加这种微生物的繁殖速度,逐渐淘汰其它微生物,这种培养基称为增殖培养基,这种培养基常用于菌种筛选和选择增菌中。在某种程度上讲,增殖培养基也是一种选择培养基。c.鉴别培养基在培养基中加入某种试剂或化学药品,使难以区分的微生物经培养后呈现出明显差别,因而有助开快速鉴别某种微生物。这样的培养基称之为鉴别培养基。例如用以检查饮水和乳品中是否含有肠道致病菌的伊红美蓝培养基就是一种常用的鉴别性培养基。培养基制备器功能强大的加热器,能够迅速加热。

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无菌补料:通过分装口可以定量添加无菌添加剂。大尺寸的分装口带有安全锁。通过使用一个瓶子将添加剂添加到分装开口或通过一个septum膜,使用注射器将添加剂加入,确保了添加剂的无菌添加。无菌分装:培养基制备器的分装口可以在分装的时候打开,用于无菌分装培养基。硅胶管是使用分装接头连接到分装口。为了确保培养基的无菌分装,硅胶管和分装接头必须提前在灭菌器中灭菌。培养基可以通过集成的空压机产生的无菌空气压力分装或通过连接到常见的蠕动泵或其他集成成泵的装置,来进行培养基的分装。制备培养基的操作要点:易于控制微生物的生长代谢状态。湖南琼脂灭菌 培养基制备器

培养基制备器灭菌锅关闭放气阀前,将锅内气体排干净。湖南琼脂灭菌 培养基制备器

微生物检验培养基制备的要点:培养基灭菌处理:分装完成的培养基应马上灭菌。其杀毒灭菌方式主要有三种类型:高压蒸汽灭菌方式,此方法可用于大多数耐热培养基。对于小份:使用121°C十五分钟;大份:121°C三十分钟;对于含碳水化合物的中.海培养基,需113~115°C十五分钟。灭菌以避免糖分的破坏。煮沸灭菌法方式,此方法可用于含有不耐高温物质的培养基。过滤除菌方式,过滤除菌,采用无菌技术定量添加培养基。血液和可以用无菌技术抽取并加入冷却至约五十度的培养基中。当中'海培养基中含有不耐热物质时可以使用此方法。湖南琼脂灭菌 培养基制备器

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