升级版-外泌体脂质定量试剂盒脂质是外泌体的主要组成部分,可以测量外泌体中脂质含量来对外泌体进行定量和质量表征!从原理上来说,既然蛋白浓度可以一直作为外泌体定量和表征的重要指标。那么用脂质来对外泌体进行定量和表征也是非常可行的。升级版外泌体脂质定量试剂盒突出优势:试剂盒包含独特的脂质结合荧光探针,该探针分子的荧光背景低,在与脂质结合时发出明亮的荧光,从而测量样品的脂质含量。特异性检测外泌体脂质,该探针只与外泌体脂质结合才能发光,与其他杂质(核酸、蛋白、糖、盐等)不结合,可以特异性检测外泌体脂质。线性范围广,灵敏度高,线性范围:0-1000μg/mL,检测灵敏度可达50μg/mL。重复性好,CV值低,可以保证脂质测量的准确性。适用于多种脂质类型,外泌体的脂质主要是磷脂,本试剂盒可以检测到磷脂,用于外泌体定量和表征。同时也可以检测其他多种脂质。应用范围:外泌体/LNP脂质定量、外泌体表征产品信息:ExosomalLipidQuantificationKit(Fluorometric)(WSR0028-2)外泌体研究工具复溶后稳定性强,多次使用不影响效果,减少浪费。组织胞外囊泡厂家

大体积外泌体样本量处理方案大体积外泌体样本在浓缩后根据不同应用,衔接不同的外泌体分离纯化方法,见下文。01外泌体分离纯化对于外泌体的分离纯化,市面上已有许多方法。维思克思总结出常用、简便、效果比较好的三种方法。SEC重力柱基于分子排阻色谱原理,根据被分离组分分子大小差异进行外泌体的分离。具有操作简便、高纯度和高回收率等优点,特别适用于大体积样本中的外泌体分离。SEC离心柱是离心柱式的外泌体分离产品,离心柱中装填的介质能无差别的吸附杂质而不结合外泌体,实现超快速、高收率的外泌体分离。磁珠法外泌体分离试剂盒能特异性捕获外泌体而不吸附杂质,实现高纯度、高回收率外泌体分离。具有操作简便、高纯度和高回收率等优点,特别适用于血浆、血清等复杂样本中的外泌体分离。02外泌体RNA提取在外泌体RNA提取步骤中,常用的是磁珠法和沉淀法。磁珠法外泌体总RNA提取试剂盒能特异性捕获外泌体,实现高纯度、高回收率提取,特别适用于血浆、血清等复杂样本RNA提取。沉淀法外泌体总RNA提取试剂盒,于外泌体微量RNA的提取,具有提取效率高、提取的RNA种类多、回收的miRNA含量高等特点。组织胞外囊泡厂家外泌体研究工具自动化操作兼容,适配实验室自动化系统,提升工作效率。

外泌体研究常见问题解答61.如何鉴定提取出来的外泌体?根据MISEV2023,鉴定外泌体首先需要通过WB来鉴定细胞外囊泡的标志蛋白是否存在于样品中,通过电子显微镜来观察样品中细胞外囊泡的形态特征,通过NTA等手段来分析样品中细胞外囊泡的群体特征(粒子浓度、直径分布等)。一般从外泌体形态、外泌体粒径和外泌体标志物来鉴定。(1)鉴定外泌体形态:通常使用透射电镜检测(TEM);(2)鉴定外泌体粒径(大小)和浓度:可以使用纳米颗粒跟踪分析(NTA)、纳米流式、纳米库尔特粒度仪检测;(3)鉴定动物细胞外泌体标志物:通常使用WB检测外泌体标志蛋白(CD63、CD9、CD81、TSG101、Alix等),按国际细胞外囊泡协会的建议为检测3个阳性(一般选择2个表面标志,1个内部标志)和1个阴性指标(Calnexin或GM130)。
外泌体研究常见问题解答119.在分离过程中,外泌体含量会发生变化吗?准备的步骤越少,结果越好。很明显,即使你是一个非常熟练的操作员,将超离作为预富集步骤也会导致囊泡的损失。因此,即使囊泡的纯度很高,也无法控制哪些囊泡在处理过程中的丢失。10.为什么沉淀法或超速离心法提取的外泌体看不到沉淀?这种问题通常有三种可能性:1)使用的样本体积太小或外泌体含量太低。2)使用了不透明的超速离心管,一般来说外泌体产量都比较小,不透明管底很难见到明显沉淀的,可以当作有沉淀,继续往后操作即可。3)使用了粘附性低的耗材。部分角转管壁粘附性很低,沉淀很难富集或沉淀很容易滑落,请圆底离心管离心。11.外泌体和微囊泡可以分开提取吗?外泌体和微囊泡无法明确区分二者,所以无法完全分开。维思克思推荐使用下列简便方法:提取外泌体等粒子直径小的细胞外囊泡时,请选用10000g离心后的上清样品;提取含微囊泡在内的大粒子直径的细胞外囊泡时,首先要回收1200g离心的上清,然后将其10,000g离心分离获得的沉淀用PBS悬浮后作为样品使用。同时提取上述两种细胞外囊泡,请使用1200g离心分离的上清作为样品。外泌体研究工具简易操作设计,无需复杂设备,降低实验室入门成本。

外泌体研究常见问题解答51.外泌体样品如何保存?长期保存,置于-80℃。冻存前,离心去除细胞和细胞碎片,再将样品分装保存在-80℃。如果条件允许,建议用新鲜样品进行外泌体的分离和后续实验。短期保存(1-2天),置于4℃(确保无菌)。2.分离的外泌体如何保存?(1)使用低吸附离心管或冻存管,减少外泌体粘附。(2)对于短期而言,外泌体可以在4°C下储存长达1周。对于长期储存,外泌体可以在-20°C或-80°C下储存。当长期储存外泌体时,重要的是要考虑它们是否需要多次解冻。如果需要多次应用(因此需要多次解冻)进行分析,我们建议将外泌体悬浮液等分到多个试管中,以便每个试管只经历一个冷冻/解冻循环。多次冻融循环会对外泌体造成损伤并减少其数量。外泌体研究工具简化包装方案,按需定制规格,降低包装物料浪费。组织胞外囊泡厂家
外泌体研究工具高效生产周期,快速响应订单,满足紧急实验需求。组织胞外囊泡厂家
外泌体是科学研究的热点,可怎么才能追踪到外泌体在体内的踪迹呢?很多研究者都被这一点给难住了。尽管市面上已经有了许多追踪染料,但这些染料要么就是荧光信号太弱,要么就是背景太高,都存在很多不足。维思克思曾经也深受其害,经过长时间的沉淀与积累,我们终于带来由发明**“一种pH敏感型探针分子及其应用、一种探针分子的合成方法”转化而来的示踪试剂盒!外泌体标记步骤:1试剂准备。使用时将WisTracker提前从-20℃取出,避光解冻后备用。2标记外泌体。将解冻后的WisTracker添加到外泌体溶液中,室温避光反应30min。3游离探针的去除。推荐用维思克思的WSR0015一步普通离心去除游离探针,得到纯净的荧光标记外泌体。外泌体示踪步骤:1接种细胞。取合适密度的细胞,接种于共聚焦平皿中置于合适条件下培养。2孵育外泌体。细胞计数,当细胞生长到70%时,加入荧光标记的外泌体于细胞培养条件下避光孵育2-4h。3清洗与染色。取出平皿,用PBS清洗3次,加入DAPI溶液,室温避光孵育10min,孵育完成后再用PBS清洗3次。4荧光检测。在激光共聚焦显微镜下观察细胞和外泌体,并拍照记录。组织胞外囊泡厂家
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