外泌体研究常见问题解答145.外泌体RT-qPCR实验是选择哪个靶标作为内参？外泌体没有公认内参，理由如上。常规内参基因在外泌体中表达量甚至可能比目标基因还低。外参是在没有合适内参的情况下的替代物。miRNA检测外参是化学合成的线虫短片段单链RNA(cel-miR-39-3p)在人、小鼠、大鼠中均无同源片段，比较大限度降低了对定量实验造成的干扰。6.外泌体SmallRNA-seq实验，样本量有什么要求？肿瘤细胞系推荐使用40mL以上的初始样品量。某些细胞（如悬浮细胞、干细胞、神经细胞等）中外泌体含量比较低，建议使用100mL的初始样品量。一般需提取到10ng以上的TotalRNA，才可以用于S...

干细胞外泌体继承了干细胞的再生修复与免疫调控功能，同时规避了干细胞移植的诸多风险，成为再生医学领域的**研究方向，相比干细胞移植，具备更高的安全性与稳定性。干细胞外泌体无细胞活性，不会在体内异常增殖、分化，不存在**形成、免疫排斥、伦理争议等问题，生物安全性极高；其结构稳定，可低温保存、运输，便于临床标准化制备与应用，无需考虑细胞培养、存活等难题。目前研究**多的是间充质干细胞外泌体，广泛应用于皮肤损伤修复、骨关节炎、神经损伤、心肌损伤、肝脏损伤等多种疾病的***研究，能够通过传递生长因子、***因子、调控RNA，抑制炎症、抗氧化应激、促进组织细胞增殖与分化，加速组织再生修复。此外，干细胞外泌...

外泌体是一类由真核细胞主动分泌、直径介于30-150nm的纳米级囊泡结构，属于细胞外囊泡的重要亚型，***存在于血液、唾液、尿液、脑脊液、乳汁等各类体液以及细胞培养上清液中，是细胞间信息传递的关键媒介。与凋亡小体、微囊泡等其他细胞外囊泡不同，外泌体并非细胞破裂或凋亡的产物，而是通过细胞内多囊泡体与细胞膜融合后，将内部囊泡释放到胞外环境形成，这一独特形成机制决定了其结构与内含物的特异性。外泌体具有双层脂质膜结构，膜上富含跨膜蛋白、黏附分子及脂质成分，能够保护内部包裹的核酸、蛋白质、脂质等生物活性物质不被体液中的酶类降解，同时介导其靶向运输至受体细胞，实现细胞间的物质交换与信号传导，几乎所有人体细...

磁珠法外泌体分离试剂盒。清晨的九点钟你开启了复杂的外泌体分离工作，满怀期待地检测纯度，却发现外泌体纯度太低？或者，分离出的外泌体结构不完整？我们也曾与你一样为分离外泌体而伤神。经研发团队日复一日的实验与开发，现在，我们重磅推出王炸产品外泌体分离试剂盒（磁珠法）！本试剂盒基于自主研发的均相液体磁珠，能特异性捕获外泌体而不吸附杂质，实现外泌体分离。具有操作简便、高纯度和高回收率等优点，特别适用于血浆、血清等复杂样本中的外泌体分离。分离的外泌体可用于WB分析、NTA或纳米流式粒径分析、电镜检测、组学研究、细胞和动物功能研究等。产品优势：分离时间短，磁珠具有超chao强顺磁性，该性质使得磁珠能在外界磁...

外泌体作为近几年的“科研新贵”，可谓是红极一时。由于它们具有独特的迁移、靶向和选择性内化进入特定细胞的能力，是非常有前途的递送载体。然而，目前在外泌体研究和应用上还存在以下痛点：痛点一：由于目前对这些内源性囊泡了解还不够深入，尤其是在体内行为方面上，将外泌体治zhi疗转诊至临床故而仍为一大难点。体内追踪外泌体可以提供有关其生物分布、迁移能力、毒性、生物学的重要知识角色，沟通能力和行动机制。痛点二：目前对于胞外囊泡的标记方法有很多种，包括亲脂性的染料(如PKH系列、Dil系列)，然而这些染料标记方法存在一些不足。维思克思的示踪探针基于两项发明**，对比其他染色方法，该探针具有低背景、高效率、强耐...

外泌体研究历经数十年发展，从**初的细胞代谢废弃物认知，转变为生命科学与临床医学的**研究领域，未来仍有广阔的探索空间与发展前景。基础研究层面，将进一步深入解析外泌体的分选机制、靶向识别机制、胞内信号调控机制，**不同细胞外泌体的功能特异性与调控网络；临床应用层面，将加快推进外泌体液体活检产品的临床获批，实现多种疾病的早筛早诊与动态监测，同时推动工程化外泌体***药物、干细胞外泌体产品的临床转化，攻克**、神经退行性疾病、难治性炎症等疑难病症。技术层面，将实现外泌体分离、鉴定、制备的全流程标准化，研发高效、低成本的工业化生产技术，降低临床应用成本；此外，外泌体与其他前沿技术（如基因编辑、免疫*...

外泌体研究常见问题解答122.做外泌体研究，需要多少量的蛋白质？不建议过多关注蛋白质浓度，我们的经验，蛋白质测量与制剂中外泌体的数量之间几乎没有相关性。蛋白量不应作为制剂中外泌体数量的估计。外泌体与蛋白量并不总是一个很好的相关性。我们主要使用细胞培养基和尿液作为起始样本，即使在这种“简单”的溶液中（至少与血浆/血清相比），相关性也不是很好。这就是为什么我们开始关注细胞培养生长条件，并标准化外泌体收获条件，以便在正确的时间收获并提高系统的可重复性。血浆和血清中蛋白质浓度和外泌体含量之间的相关性会更小。许多研究人员使用纳米颗粒跟踪分析（NTA）来测量囊泡的数量和大小分布，但这种方法不能提供相同大小...

免疫细胞是外泌体分泌**为活跃的群体之一，免疫系统利用外泌体在细胞间传递抗原信息、调控免疫应答强度与类型，维持免疫稳态。树突状细胞（DC）分泌的外泌体（dexosomes）是这一领域的明星分子：成熟DC来源的外泌体携带主要组织相容性复合体-抗原肽复合物和共刺激分子（CD80、CD86），可直接***CD8+ T细胞，诱导特异性抗肿瘤免疫应答；而非成熟DC来源的外泌体缺乏共刺激分子，反而诱导免疫耐受，在自身免疫性疾病和移植排斥中具有***价值。巨噬细胞极化为M1型（促炎）或M2型（***）后，其外泌体的分子谱也发生相应转变，M1外泌体富含促炎性微小RNA（如miR-155），可诱导受体巨噬细胞向...

心血管疾病是全球首要死因，外泌体在这一领域展现出诊断与***的双重潜力。在心肌梗死、心力衰竭、***等病理状态下，心肌细胞、内皮细胞及免疫细胞释放的外泌体组成发生***改变。例如，急性心肌梗死患者循环外泌体中miR-1、miR-208a等心脏特异性微小RNA的表达水平在胸痛发作后数小时内即***升高，其敏感性和特异性优于传统的心肌肌钙蛋白，为早期诊断提供了新工具。在***层面，外泌体展现了***的心脏保护作用。心脏祖细胞、间充质干细胞来源的外泌体在心肌梗死动物模型中，通过递送miR-21、miR-146a等分子，抑制心肌细胞凋亡、促进血管新生、减轻纤维化，***改善心功能。尤为关键的是，外泌体...

外泌体研究常见问题解答119.在分离过程中，外泌体含量会发生变化吗？准备的步骤越少，结果越好。很明显，即使你是一个非常熟练的操作员，将超离作为预富集步骤也会导致囊泡的损失。因此，即使囊泡的纯度很高，也无法控制哪些囊泡在处理过程中的丢失。10.为什么沉淀法或超速离心法提取的外泌体看不到沉淀？这种问题通常有三种可能性：1）使用的样本体积太小或外泌体含量太低。2）使用了不透明的超速离心管，一般来说外泌体产量都比较小，不透明管底很难见到明显沉淀的，可以当作有沉淀，继续往后操作即可。3）使用了粘附性低的耗材。部分角转管壁粘附性很低，沉淀很难富集或沉淀很容易滑落，请圆底离心管离心。11.外泌体和微囊泡可以...

外泌体研究常见问题解答91.外泌体的分离方法有哪些，哪种更好？分离是进行外泌体研究关键的一步，只有选择了合适的方法才能得到理想的实验结果。分离方法包括：超速离心、尺寸排阻、免疫磁珠、聚合物沉淀、亲和磁珠/膜等方法。根据外泌体的大小，密度和表面标志物的不同进行分离，不同提取外泌体方法优劣势比较，受限于篇幅，详细版请联系维思克思生物科技获取。2.细胞培养上清中死细胞对外泌体分离的影响？在细胞凋亡/死亡过程中会释放大量Evs，会混入活细胞分泌的外泌体中，而目前的外泌体分离方法并不能将两者区分开来。所以在收集细胞培养上清样本时，需要保证细胞活率应不小于95%。3.大体积的样本类型，如何分离外泌体？大体...

SEC法外泌体分离试剂盒。或许你想做外泌体相关研究，却不知如何下手？或许你苦练提纯术却不知如何获得高纯度外泌体？现在可以用UniversalExosomeIsolationKit（SEC外泌体分离试剂盒）来解决以上问题了！本产品分离的外泌体纯度高、回收率高的特点，能够满足绝大多数科研需求。操作简便使用本品时无需复杂设备、从上样到外泌体收集只需半小时。适用范围广适用于各类样本，包括但不限于细胞上清、尿液、血清、血浆等。分离的外泌体结构均一完整、只回收固定范围的外泌体囊泡。使用方法：样品与纯化柱预处理后，按纯化柱规格上样（10mL纯化柱上样1mL；30mL纯化柱上样3mL）。样本滴完后每次加入0....

脂质定量试剂盒应用场景：外泌体表征、脂质体定量工具、脂质功能研究方法、脂质代谢疾病进展评估。外泌体表征。外泌体由磷脂双分子层包裹，包含脂质等代谢物。脂质定量试剂盒可用于外泌体的脂质定量，既可以测定外泌体的脂质含量，为脂质研究提供有力工具，又能作为外泌体定量和表征方法的有效补充。脂质体定量工具。脂质体是一种类似生物膜结构的脂质双分子层微小囊泡。随着生物技术的发展，脂质体制备工艺的逐步完善，其在药物递送方面应用逐渐成熟。近，脂质体也应用在化妆品行业和食品行业。脂质定量试剂盒可用于指导脂质体、纳米脂质颗粒等脂质含量测定，工艺优化、配方开发。由于试剂盒具有获取容易，检测速度快，灵敏度高等优点，可以加快...

外泌体研究常见问题解答122.做外泌体研究，需要多少量的蛋白质？不建议过多关注蛋白质浓度，我们的经验，蛋白质测量与制剂中外泌体的数量之间几乎没有相关性。蛋白量不应作为制剂中外泌体数量的估计。外泌体与蛋白量并不总是一个很好的相关性。我们主要使用细胞培养基和尿液作为起始样本，即使在这种“简单”的溶液中（至少与血浆/血清相比），相关性也不是很好。这就是为什么我们开始关注细胞培养生长条件，并标准化外泌体收获条件，以便在正确的时间收获并提高系统的可重复性。血浆和血清中蛋白质浓度和外泌体含量之间的相关性会更小。许多研究人员使用纳米颗粒跟踪分析（NTA）来测量囊泡的数量和大小分布，但这种方法不能提供相同大小...

外泌体研究常见问题解答47.外泌体中是否存在18SmRNA？通过测序和qPCR分析了外泌体RNA的含量，这些囊泡肯定包括一些18sRNA。早期的论文具有误导性，一个团队声称外泌体是miRNA和mRNA阴性的。事实上，外泌体包含核糖体RNA、tRNA和许多非编码RNA，并且很大一部分miRNA实际上与蛋白质（例如Ago2）相关，而不是外泌体。8.外泌体研究的困难是什么？（1）外泌体异质性，包括来源异质性、大小异质性、成分异质性等；（2）高纯度的外泌体获取；（3）外泌体鉴定表征；（4）外泌体保存。外泌体不具备强免疫原性，生物相容性佳，应用过程中不易引发排异反应。组织EVs保存外泌体研究常见问题解答...

外泌体的保存是否重要？在外泌体研究中，储存稳定性是一直困扰广大科研工作者的难题。目前外泌体一般在PBS中，置于-80℃分装冻存，但随着冻存时间和冻融次数的增加，将会严重影响外泌体的活性、完整性、货物含量等。针对上述难点，维思克思开发出外泌体的冻存保存液，直接混入外泌体样本中，置于-20℃、-80℃冻存，可明显改善储存样品的短期和长期稳定性。产品特点：操作简便，可直接混入外泌体样本中，无需过多操作。保护效果好，使用后外泌体生物活性稳定，多次冻融后外泌体颗粒数、表面标志物蛋白均无明显差异。适用样本范围广，可适用于所有外泌体样本（包括植物、动物、微生物、人来源外泌体）。产品信息：WisExoExos...

心血管疾病是全球首要死因，外泌体在这一领域展现出诊断与***的双重潜力。在心肌梗死、心力衰竭、***等病理状态下，心肌细胞、内皮细胞及免疫细胞释放的外泌体组成发生***改变。例如，急性心肌梗死患者循环外泌体中miR-1、miR-208a等心脏特异性微小RNA的表达水平在胸痛发作后数小时内即***升高，其敏感性和特异性优于传统的心肌肌钙蛋白，为早期诊断提供了新工具。在***层面，外泌体展现了***的心脏保护作用。心脏祖细胞、间充质干细胞来源的外泌体在心肌梗死动物模型中，通过递送miR-21、miR-146a等分子，抑制心肌细胞凋亡、促进血管新生、减轻纤维化，***改善心功能。尤为关键的是，外泌体...

神经退行性疾病如阿尔茨海默病、帕金森病、肌萎缩侧索硬化症等的共同病理特征是错误折叠蛋白在脑内的异常聚集与传播。近年来的研究揭示，外泌体是这些毒性蛋白在神经元间“传染”的关键载体。在阿尔茨海默病中，小胶质细胞和神经元释放的外泌体携带β-淀粉样蛋白和过度磷酸化的Tau蛋白，这些外泌体可被邻近神经元摄取，诱导内源性Tau蛋白的聚集，形成病理扩散的级联反应。类似地，帕金森病中的α-突触**白可通过外泌体在脑区间传播，介导病理的解剖学进展。然而，外泌体在神经系统中并非只有“恶化”角色。另一方面，它们也参与***毒性蛋白——神经元可将聚集的致病蛋白排入外泌体，再由小胶质细胞吞噬***，发挥“细胞垃圾处理”...

你真的知道如何正确收集和保存EVs吗？样本的收集和保存是导致实验结果不确定性的一个重要来源。维思克思长期研究以及不断试错得出的“EVs样本收集和保存”经验，分享给各位外泌体研究者。血液。血液采集优先隔夜空腹。血浆通常是EVs的优先来源，因为在制备血清时凝块形成期间会释放额外的EVs。目前，血清的主要应用是研究miRNA。要制备血浆，血液需要抗凝。细胞培养上清分离EVs。污染EVs和可检测到的非EV组分的主要来源是培养基中的血清。如果细胞不能在无血清培养基中生长，获取的EVs将不再纯净，后续研究结果也将不准确。建议超速离心从血清中去除EVs或购买不含EV血清（WSC0020）；培养中监测细胞活率...

外泌体凭借其***、修复、再生、**的**功效，逐步成为医美领域的新兴热门成分，打破了传统医美产品效果有限、副作用明显的局限，应用范围覆盖皮肤**、创面修复、敏感肌修复、痘印淡化等多个场景。皮肤老化的**原因是胶原蛋白流失、细胞活性下降、炎症因子堆积，而干细胞来源外泌体能够深入皮肤真皮层，***皮肤成纤维细胞活性，促进胶原蛋白与弹性纤维合成，改善皮肤细纹、松弛、暗沉等老化问题，实现深层**；对于医美术后创面（如激光、微针术后），外泌体可快速抑制炎症、加速表皮修复，缩短恢复期，避免色素沉着；针对敏感肌、激素脸等受损皮肤，外泌体能够修复皮肤屏障，调节皮肤免疫状态，缓解泛红、瘙痒、刺痛等敏感症状，且...

外泌体表征与定量难在什么地方？又该怎么做？我们拜访过很多外泌体研究工作者，其中谈到多的是外泌体难以分离，分离后的外泌体不好定量，定量的外泌体数据是否准确等问题。很多人认为外泌体的分离难点在于样本差异、杂质类型或外泌体来源于细胞等，但业内人事认为，外泌体的分离之难，在于没有很好的方法去判定外泌体的纯度和活性。本文从外泌体定量和表征的角度来分析，什么样的外泌体才是高质量的，以及如何对外泌体进行计数。单一定量和表征方法的局限性对外泌体的鉴定方法，目前行业内基本上是一致的：通过形态、粒径范围、标志蛋白等定性检测。1.单一定量方法的局限性对外泌体的定量，使用较多的还是颗粒数。众所周知，外泌体被定义为30...

代谢性疾病主要包括糖尿病、肥胖症、非酒精性脂肪肝等，这类疾病的发***展与机体代谢紊乱、慢性低-grade炎症密切相关，而外泌体作为细胞间信号载体，深度参与代谢调控与炎症反应，成为代谢性疾病研究的新靶点。肥胖患者脂肪细胞分泌的外泌体，可携带促炎因子与代谢调控因子，作用于肝脏、肌肉、胰腺等靶***，诱导胰岛素抵抗，推动2型糖尿病与非酒精性脂肪肝的发生；糖尿病患者胰岛细胞分泌的外泌体，可损伤胰岛β细胞功能，加重胰岛素分泌不足，同时加剧外周组织的胰岛素抵抗。反之，正常脂肪细胞、间充质干细胞分泌的外泌体，能够改善胰岛素敏感性，调节糖脂代谢，缓解代谢紊乱。此外，代谢性疾病患者体液中的外泌体标志物，可用于...

沉淀法外泌体分离试剂盒经典、操作简便的外泌体分离方法！假如你没有超速离心机，假如对提取出的外泌体中含有透明质酸等多糖而头疼不已，那你一定要来试试这款沉淀法分离试剂盒。WSR0026是一款沉淀法外泌体分离试剂盒，可用于多种样本的外泌体分离，具有操作简便、分离速度快和外泌体回收率高等特点。分离的外泌体可用于WB分析、NTA或纳米流式粒径分析、电镜检测、组学研究、细胞和动物功能研究等。使用方法：需要将沉淀试剂加入到样本中孵育，然后高速离心即可得到外泌体。产品优势：适用范围广，血浆、血清等复杂样本和细胞上清、尿液等简单样都适用；回收率高，相较于其他方法，获取的外泌体浓度高；操作简便，不需特殊设备，操作...

需离心三次，这么方便的外泌体分离试剂盒你见过吗？为方便各位老师使用我司试剂盒，我司将持续更新各个试剂盒使用教程视频，请各位持续关注哦！维思克思的外泌体分离产品-SEC离心柱法外泌体分离试剂盒，只需要3次低速离心即可实现外泌体的高效分离，你见过吗？详情可联系客服。产品信息：SpinColumnExosomeIsolationKit（WSR0015）；ExoIsoSpinColumn（WSP0015）；ExoIsoSpinColumnPlus（WSP0016）。维思克思生物科技(武汉)有限公司外泌体研究工具主要技术自主研发，持续迭代升级，提升研究价值。大规模Extracellular Vesicl...

外泌体分离提取方法大全外泌体快速、简便、高纯度、高回收率的分离方法是在大规模应用的前提。维思克思编制了外泌体分离方法大全：亲和磁珠法分离（WSR0002-2）能特异性捕获外泌体，实现高纯度、高回收率外泌体分离。具有操作简便、高纯度和高回收率等优点，特别适用于血浆、血清等复杂样本中的外泌体分离。凝胶排阻色谱法分离（WSR0003）基于分子排阻色谱（SEC）原理，根据被分离组分分子大小差异进行外泌体的分离，可以获取分子大小均一、高纯度的外泌体。特别适用于大体积样本中的外泌体分离。SEC离心法分离（WSP0015/WSP0016）是离心柱式的外泌体分离产品，离心柱中装填的介质能无差别地吸附杂质而不结...

SEC法外泌体分离试剂盒。或许你想做外泌体相关研究，却不知如何下手？或许你苦练提纯术却不知如何获得高纯度外泌体？现在可以用UniversalExosomeIsolationKit（SEC外泌体分离试剂盒）来解决以上问题了！本产品分离的外泌体纯度高、回收率高的特点，能够满足绝大多数科研需求。操作简便使用本品时无需复杂设备、从上样到外泌体收集只需半小时。适用范围广适用于各类样本，包括但不限于细胞上清、尿液、血清、血浆等。分离的外泌体结构均一完整、只回收固定范围的外泌体囊泡。使用方法：样品与纯化柱预处理后，按纯化柱规格上样（10mL纯化柱上样1mL；30mL纯化柱上样3mL）。样本滴完后每次加入0....

沉淀法外泌体分离试剂盒经典、操作简便的外泌体分离方法！假如你没有超速离心机，假如对提取出的外泌体中含有透明质酸等多糖而头疼不已，那你一定要来试试这款沉淀法分离试剂盒。WSR0026是一款沉淀法外泌体分离试剂盒，可用于多种样本的外泌体分离，具有操作简便、分离速度快和外泌体回收率高等特点。分离的外泌体可用于WB分析、NTA或纳米流式粒径分析、电镜检测、组学研究、细胞和动物功能研究等。使用方法：需要将沉淀试剂加入到样本中孵育，然后高速离心即可得到外泌体。产品优势：适用范围广，血浆、血清等复杂样本和细胞上清、尿液等简单样都适用；回收率高，相较于其他方法，获取的外泌体浓度高；操作简便，不需特殊设备，操作...

你分离的血清/血浆外泌体真的干净吗？对于血清和血浆等复杂样本，分离外泌体是十分棘手的。主要原因是血液样本的成分比较复杂，很容易造成细胞外囊泡的污染。脂蛋白颗粒就是常见细胞外囊泡难以分离的污染物之一。外泌体与脂蛋白的体积、密度十分相近，以至于很多传统的方法都不能把他们完全分离。1.密度梯度超速离心高密度脂蛋白的密度与细胞外囊泡密度相近，所以它是密度梯度离心主要的污染脂蛋白。低密度脂蛋白虽密度低于EV，但离心的方法还不足以完全将二者分开。因此使用密度梯度超速离心的方式可能无法完全排除脂蛋白污染的可能性。2.分子排阻法（SEC）SEC是根据粒径大小进行外泌体分离。脂蛋白与外泌体尺寸相近，尤其是极低密...

外泌体研究常见问题解答47.外泌体中是否存在18SmRNA？通过测序和qPCR分析了外泌体RNA的含量，这些囊泡肯定包括一些18sRNA。早期的论文具有误导性，一个团队声称外泌体是miRNA和mRNA阴性的。事实上，外泌体包含核糖体RNA、tRNA和许多非编码RNA，并且很大一部分miRNA实际上与蛋白质（例如Ago2）相关，而不是外泌体。8.外泌体研究的困难是什么？（1）外泌体异质性，包括来源异质性、大小异质性、成分异质性等；（2）高纯度的外泌体获取；（3）外泌体鉴定表征；（4）外泌体保存。外泌体研究工具高效生产周期，快速响应订单，满足紧急实验需求。黄芪外泌体细胞外囊泡动物实验外泌体研究常见...

外泌体定量和表征。研究外泌体的同行们（包括我）一直被外泌体的定量和表征所困扰，什么样的外泌体才是好的外泌体呢？是评估其活性？纯度？蛋白浓度？还是其他什么指标？或者说我们在做实验时，怎样对外泌体进行定量呢？这个可以说是进行外泌体实验的第一步，必须确定外泌体的量，才好判断实验变量是否影响外泌体的发生或者确定下游应用实验的给药剂量。你们是如何进行定量的呢？目前的外泌体定量方法有以下几种，分别是：纳米颗粒跟踪分析（NTA）、纳米流式、表面标志物的ELISA定量试剂盒、BCA或Bradford蛋白定量试剂盒。注：受认知所限，有没有涵盖的，欢迎补充。上述外泌体定量方法中，以BCA蛋白浓度测定应用的广，也容...