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沉淀法外泌体分离试剂盒经典、操作简便的外泌体分离方法！假如你没有超速离心机，假如对提取出的外泌体中含有透明质酸等多糖而头疼不已，那你一定要来试试这款沉淀法分离试剂盒。WSR0026是一款沉淀法外泌体分离试剂盒，可用于多种样本的外泌体分离，具有操作简便、分离速度快和外泌体回收率高等特点。分离的外泌体可用于WB分析、NTA或纳米流式粒径分析、电镜检测、组学研究、细胞和动物功能研究等。使用方法：需要将沉淀试剂加入到样本中孵育，然后高速离心即可得到外泌体。产品优势：适用范围广，血浆、血清等复杂样本和细胞上清、尿液等简单样都适用；回收率高，相较于其他方法，获取的外泌体浓度高；操作简便，不需特殊设备，操作简便；高通量，可同时处理多个样本。产品信息：WisExoExosomeIsolationKit（Precipitation）（WSR0026）。外泌体研究工具常温运输设计，无需冷链物流，降低运输成本与风险。植物EVs冻干

外泌体表征与定量难在什么地方？又该怎么做？我们拜访过很多外泌体研究工作者，其中谈到多的是外泌体难以分离，分离后的外泌体不好定量，定量的外泌体数据是否准确等问题。很多人认为外泌体的分离难点在于样本差异、杂质类型或外泌体来源于细胞等，但业内人事认为，外泌体的分离之难，在于没有很好的方法去判定外泌体的纯度和活性。本文从外泌体定量和表征的角度来分析，什么样的外泌体才是高质量的，以及如何对外泌体进行计数。单一定量和表征方法的局限性对外泌体的鉴定方法，目前行业内基本上是一致的：通过形态、粒径范围、标志蛋白等定性检测。1.单一定量方法的局限性对外泌体的定量，使用较多的还是颗粒数。众所周知，外泌体被定义为30-150nm的小细胞外囊泡，比较大和小的外泌体表面积相差25倍、体积相差125倍。而外泌体发挥功能主要依赖其所载货物，比较大和小外泌体对受体细胞的效应也会有较大差异。同时颗粒数的检测方法包括NTA或纳米流式等，并不能分辨外泌体和其他具有相识粒径的其他杂质，在计算颗粒数时，不同纯度外泌体数据的可参考性也并不相同。所以通过颗粒数来对外泌体定量，可能有其局限性。植物EVs冻干外泌体研究工具梯度规格选择，满足不同实验规模，成本可控性强。

外泌体样本量太大怎么办？外泌体来源，几乎所有细胞都可以分泌外泌体。在科研中，如何处理大体积外泌体样本是众多研究者都觉得十分棘手的问题。目前，常用的分离手段包括超速离心法、尺寸排阻法、沉淀法以及免疫亲和法。然而这些分离方法要么只适用于小体积微量样本，要么就是对仪器要求高、操作复杂。与各位研究者分享维思克思的大体积样本处理经验，愿能为各位研究者提供思路。1.外泌体浓缩试剂。外泌体浓缩试剂可用于大体积外泌体样本的处理，可以高通量、快速实现大体积外泌体样本（如细胞培养上清、尿液等）的浓缩，浓缩后的样本后处理后可进行外泌体的分离纯化、RNA提取、蛋白提取等后续实验。2.超滤管超滤。超滤浓缩是一种常用的分离技术，利用超滤膜对组分进行分离。溶液通过超滤膜，利用膜孔的大小选择性，将分子量较大的物质过滤出来，而将分子量较小的物质通过膜孔。以上大体积外泌体样本处理工具，维思克思均有提供。外泌体浓缩试剂以及超滤管在处理大体积样本上具有突出优势。尤其是外泌体浓缩试剂，操作简便，浓缩倍数高，实验体验有较好的评价，推荐指数较高。浓缩后的外泌体分离纯化，维思克思产品线也非常齐全，包括磁珠法、SEC法等。

外泌体研究常见问题解答35.CD9或CD81等是否对外泌体起源具有特异性？目前，对于一般的外泌体标记物还没有达成共识。研究界目前的建议是结合检测许多膜结合或膜相关蛋白，以验证膜的存在。靶点CD63和CD81存在于许多不同的外泌体制剂中，CD9也是如此。然而，检测到至少2种不同的细胞系释放CD9阴性的外泌体（Jurkat细胞和几种B细胞淋巴瘤细胞）。同样重要的是，通过对已知在ER、高尔基体或细胞核等隔室中表达的标记物进行染色，来证明不存在污染性囊泡。同样重要的是，用相同的标记物来表征宿主细胞。6.外泌体中是否包含DNA？一般认为外泌体中不包含DNA，或包含少量线粒体DNA。因为外泌体在胞质中形成与包裹货物，而在胞质中存在少量降解的线粒体DNA。目前有一些研究发现，在外泌体的表面，称之为“corona”，中文叫“冠“或”晕“，在外泌体分泌到细胞外后，会吸附微量的游离DNA。外泌体研究工具简易操作设计，无需复杂设备，降低实验室入门成本。

外泌体作为近几年的“科研新贵”，可谓是红极一时。由于它们具有独特的迁移、靶向和选择性内化进入特定细胞的能力，是非常有前途的递送载体。然而，目前在外泌体研究和应用上还存在以下痛点：痛点一：由于目前对这些内源性囊泡了解还不够深入，尤其是在体内行为方面上，将外泌体治zhi疗转诊至临床故而仍为一大难点。体内追踪外泌体可以提供有关其生物分布、迁移能力、毒性、生物学的重要知识角色，沟通能力和行动机制。痛点二：目前对于胞外囊泡的标记方法有很多种，包括亲脂性的染料(如PKH系列、Dil系列)，然而这些染料标记方法存在一些不足。维思克思的示踪探针基于两项发明**，对比其他染色方法，该探针具有低背景、高效率、强耐酸的优势！发明名称：1.一种pH敏感型探针分子及其应用；2.一种探针分子的合成方法。WSR0001-2工作原理为共价方式嵌入外泌体膜结构。当染料结合外泌体膜后，可通过荧光显微镜准确观察到外泌体在细胞内运动与行踪。突出优势：特异性高，无背景干扰；标记效率高，该探针以共价的方式嵌入胞外囊泡的双层膜结构，优于亲脂性染料，避免自组装形成的纳米粒子造成信号干扰。在低pH（酸性）条件下也可显色。外泌体研究工具大包装经济方案，适合长期稳定研究，平均成本更低。植物EVs冻干

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外泌体研究常见问题解答61.如何鉴定提取出来的外泌体？根据MISEV2023，鉴定外泌体首先需要通过WB来鉴定细胞外囊泡的标志蛋白是否存在于样品中，通过电子显微镜来观察样品中细胞外囊泡的形态特征，通过NTA等手段来分析样品中细胞外囊泡的群体特征（粒子浓度、直径分布等）。一般从外泌体形态、外泌体粒径和外泌体标志物来鉴定。（1）鉴定外泌体形态：通常使用透射电镜检测（TEM）；（2）鉴定外泌体粒径（大小）和浓度：可以使用纳米颗粒跟踪分析（NTA）、纳米流式、纳米库尔特粒度仪检测；（3）鉴定动物细胞外泌体标志物：通常使用WB检测外泌体标志蛋白（CD63、CD9、CD81、TSG101、Alix等），按国际细胞外囊泡协会的建议为检测3个阳性（一般选择2个表面标志，1个内部标志）和1个阴性指标（Calnexin或GM130）。植物EVs冻干

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