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氯仿买不到？维思克思包有的Trizol法提取RNA是生物实验中常用的RNA提取方法，然而使用该方法也伴随着不少困扰。比如，氯仿属于管制试剂，难以购买！比如，氯仿属于剧毒试剂，使用时气味十分难闻！如果你也遇到以上问题，为什么不选择一款更安全、更环保、使用效果和氯仿相同的氯仿替代物呢？产品特点：安全环保，购买方便；传统抽提试剂氯仿属于危险化学品，可引起急性中毒以及致。本产品与氯仿相比毒性更小，更安全、环保；分层效果明显，本产品有更强的疏水性，水相分层更为明显，易于吸取，手残党友好；RNA质量和得率无差别，提取出的RNA得率及质量与氯仿提取出的五明显差异，可完全替代氯仿；用量小，一瓶更耐用，相较于氯仿，本品抽提RNA时，操作步骤相同，但用量为氯仿的一半，更耐用；适用范围广，可适用于各种动植物细胞、组织以及微生物样本的RNA提取。产品信息：RNAExtractionAgent（WZ13）。外泌体研究工具快速复溶设计，减少实验准备时间，提升操作便捷性。尿液Exosome原料

外泌体研究常见问题解答11.外泌体是什么？通常，外泌体被定义为约1.13-1.19g/mL的囊泡（基于密度梯度离心），预期尺寸为30–150nm（基于电镜分析）。由活细胞分泌到细胞外环境的膜性小囊泡，是细胞间信息传递的重要载体，参与细胞间相互作用。几乎所有类型的细胞，都可以产生并释放外泌体。根据不同生物来源分类，外泌体分为动物细胞外泌体、植物外泌体、微生物外泌体。动物细胞来源的外泌体也可以通过其表面蛋白标记物来定义和鉴定，这些标记物包括：四跨肽（CD63、CD81、CD9）和其他类似ALIX、TSG101等标记物。目前没有合适的工具，也没有足够的知识来对外泌体做出明确而简单的定义，将其与其他微/纳米囊泡区分开。尿液Exosome原料外泌体研究工具高纯度提取试剂盒，减少杂质干扰，提升实验数据准确性。

外泌体表征与定量难在什么地方？又该怎么做？我们拜访过很多外泌体研究工作者，其中谈到多的是外泌体难以分离，分离后的外泌体不好定量，定量的外泌体数据是否准确等问题。很多人认为外泌体的分离难点在于样本差异、杂质类型或外泌体来源于细胞等，但业内人事认为，外泌体的分离之难，在于没有很好的方法去判定外泌体的纯度和活性。本文从外泌体定量和表征的角度来分析，什么样的外泌体才是高质量的，以及如何对外泌体进行计数。单一定量和表征方法的局限性对外泌体的鉴定方法，目前行业内基本上是一致的：通过形态、粒径范围、标志蛋白等定性检测。1.单一定量方法的局限性对外泌体的定量，使用较多的还是颗粒数。众所周知，外泌体被定义为30-150nm的小细胞外囊泡，比较大和小的外泌体表面积相差25倍、体积相差125倍。而外泌体发挥功能主要依赖其所载货物，比较大和小外泌体对受体细胞的效应也会有较大差异。同时颗粒数的检测方法包括NTA或纳米流式等，并不能分辨外泌体和其他具有相识粒径的其他杂质，在计算颗粒数时，不同纯度外泌体数据的可参考性也并不相同。所以通过颗粒数来对外泌体定量，可能有其局限性。

外泌体表征与定量难在什么地方？又该怎么做？我们拜访过很多外泌体研究工作者，其中谈到多的是外泌体难以分离，分离后的外泌体不好定量，定量的外泌体数据是否准确等问题。2.单一表征方法的局限性对外泌体的纯度表征目前采用的是外泌体阴性蛋白标志、颗粒蛋白比。外泌体阴性蛋白标志一般采用WB检测，属于定性检测，与样本处理、抗体、显色、曝光时间等多个因素有关，如果作为纯度表征的指标，显然是不合适的。在蛋白聚集体或其他杂质（糖/脂质/核酸等）聚集体/大颗粒较多时，颗粒蛋白比的数值也可能较大，其作为纯度表征指标也有其局限性。既然上述外泌体定量方法、表征方法具有其局限性，那么如何科学的对外泌体进行定量和表征呢？外泌体研究工具梯度规格选择，满足不同实验规模，成本可控性强。

外泌体研究常见问题解答134.当我的Westerns似乎不起作用时，我该怎么办？这有几个典型的原因：（1）添加的样本量不足。外泌体可能含有相当少量的蛋白质货物。对于初始实验，我们建议添加尽可能多的样本。（2）抗体不是比较好的。我们建议测试2-3家制造商的抗体（如抗CD63或其他外泌体标记物），仔细检查推荐的浓度。此外，它们比较好是新鲜使用，并且需要妥善储存。（3）根据外泌体表面标记，某些凝胶条件可能对靶抗体更为优化（例如还原/非还原和变性/非变性）。我们建议与制造商和外泌体社区核实您所针对的特异性标记物和您所使用的特异性抗体的推荐条件。（4）一般Westerns技术。Western可能很棘手，我们建议使用阳性对照进行初步测试，以确保整个工作流程正常运行。任何蛋白质或抗体都可以使用，只要它们满足您需要的条件（例如变性与非变性）。此外，在挑选蛋白质时，尽量避开样本中浓度非常高或非常低的蛋白质，以防止印迹过载或完全没有信号。外泌体研究工具稳定批次生产，确保实验重复性，降低结果波动风险。尿液Exosome原料

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外泌体的保存是否重要？在外泌体研究中，储存稳定性是一直困扰广大科研工作者的难题。目前外泌体一般在PBS中，置于-80℃分装冻存，但随着冻存时间和冻融次数的增加，将会严重影响外泌体的活性、完整性、货物含量等。针对上述难点，维思克思开发出外泌体的冻存保存液，直接混入外泌体样本中，置于-20℃、-80℃冻存，可明显改善储存样品的短期和长期稳定性。产品特点：操作简便，可直接混入外泌体样本中，无需过多操作。保护效果好，使用后外泌体生物活性稳定，多次冻融后外泌体颗粒数、表面标志物蛋白均无明显差异。适用样本范围广，可适用于所有外泌体样本（包括植物、动物、微生物、人来源外泌体）。产品信息：WisExoExosomeProtector（WSR0020）尿液Exosome原料

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