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南京CY3荧光定量PCR仪功能

来源: 发布时间:2025年09月05日

荧光标记探针法原理:使用一种特异性的荧光标记探针,它能与目标 DNA 序列杂交。探针的 5' 端标记有荧光报告基团,3' 端标记有荧光淬灭基团。在游离状态下,报告基团发出的荧光会被淬灭基团吸收,无法检测到荧光信号。当 PCR 反应进行时,DNA 聚合酶在延伸引物的过程中,会将探针水解,使报告基团与淬灭基团分离,报告基团发出的荧光信号就可以被仪器检测到。每扩增一条 DNA 链,就会有一个探针被水解,释放出一个荧光信号,荧光信号的强度与 PCR 产物的数量成正比。过程:在 PCR 反应的退火阶段,荧光标记探针会与目标 DNA 序列特异性结合。在延伸阶段,DNA 聚合酶的 5' - 3' 外切酶活性会将探针从 5' 端开始逐个水解,使报告基团游离出来,产生荧光信号。仪器会在每个循环的延伸阶段检测荧光信号的强度,随着 PCR 反应的进行,荧光信号逐渐增强,同样可以得到 Ct 值。定量依据:与荧光染料法类似,通过标准品建立标准曲线,根据待测样本的 Ct 值在标准曲线上计算出起始模板量。由于荧光标记探针具有特异性,能与特定的目标序列杂交,因此可以更准确地对目标基因进行定量分析,减少非特异性扩增的干扰。光学系统:如激发光源的强度和稳定性、荧光探测器的灵敏度和噪声水平等。南京CY3荧光定量PCR仪功能

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荧光定量PCR仪具有高灵敏度、高特异性和精确定量等特点,被广泛应用于多个行业,以下是一些主要的应用行业:生命科学研究行业基因表达分析:是研究基因表达调控的重要工具,可精确测定不同组织、不同发育阶段以及不同生理病理条件下基因的表达水平,有助于深入了解基因的功能和生物过程的分子机制。基因功能研究:通过对基因敲除、过表达或 RNA 干扰等模型中相关基因表达量的定量分析,验证基因的功能,揭示基因之间的相互作用关系。分子进化研究:分析不同物种或同一物种不同个体之间基因南京CY3荧光定量PCR仪功能通过检测孕妇外周血中的胎儿游离 DNA 或羊水、绒毛等样本中的胎儿基因,可对胎儿进行遗传性疾病的早期诊断。

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以下是判断荧光定量 PCR 仪光路系统是否需要校准的方法:熔解曲线异常峰形改变:熔解曲线的峰形变得不规则、宽化或出现多个峰,而样品和实验条件均无变化时,可能是光路系统对荧光信号的检测精度下降,导致熔解曲线的分析结果不准确,此时需要考虑对光路系统进行校准。Tm 值偏移:熔解曲线的 Tm 值(解链温度)与预期值相比出现明显偏移,且排除了引物设计、反应条件等因素的影响,可能是光路系统的荧光检测存在误差,影响了对 DNA 双链解链过程的准确监测,需要对光路进行检查和校准。

你可能想说的是 “实时荧光定量 PCR 仪”。实时荧光定量 PCR 仪是一种用于对核酸进行定量分析的仪器,在医学、生物学等领域有着广泛的应用。工作原理实时荧光定量 PCR 仪基于 PCR 技术,在 PCR 反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个 PCR 进程,通过标准曲线对未知模板进行定量分析。例如,常用的 SYBR Green I 染料,在游离状态下荧光微弱,与双链 DNA 结合后荧光明显增强,随着 PCR 产物的合成,荧光信号不断增加,仪器可实时检测到这种变化。激发光源能够稳定且有效地激发 TET 荧光染料,使其发出足够强的荧光信号。

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    杭州柏恒荧光定量PCR仪Q9600Pro采用LED光源设计,这一设计不仅实现了节能环保,也提高了设备的稳定性和使用寿命。LED光源作为一种高效节能的照明技术,不仅减少了能源的消耗,还减少了对环境的污染,符合现代社会对可持续发展的要求。LED光源的节能优势体现在多个方面。首先,LED光源在发光过程中几乎不会产生热量,相比传统的白炽灯泡或荧光灯管,LED的能源利用率更高,能够在实验过程中***降低能源消耗。其次,LED光源的发光原理与传统灯泡不同,LED是通过半导体发光,不需要加热丝或荧光粉等材料,因此功耗更低,使用寿命更长,无需频繁更换灯管,省去了不必要的维护费用。此外,LED光源的长寿命也是其优势之一。LED的寿命通常可以达到数万小时甚至更长,远远超过传统的照明设备,减少了设备的维护频率和更换成本。LED光源具有低损耗、高稳定性的特点,能够长时间保持稳定的光照强度和波长,确保实验结果的一致性和可靠性。科研人员可以更加放心地进行长时间实验,而不必担心光源的降解和影响实验结果。除了节能和长寿命外,LED光源还具有无汞、无紫外辐射等环保特点。LED光源不含有有害物质,不产生紫外辐射,对实验样品和操作人员更加安全无害。同时。 TET 的激发波长和发射波长使其能够在特定的荧光通道中被准确检测到,通常其激发波长在 520 - 550nm 左右;南京CY3荧光定量PCR仪功能

对于一些难以培养或培养周期较长的细菌,荧光定量 PCR 仪可以快速检测其特定的核酸序列,实现早期诊断。南京CY3荧光定量PCR仪功能

荧光定量 PCR 仪是一种通过荧光染料或荧光标记的特异性探针,对 PCR 产物进行标记跟踪,实时监测反应过程的仪器。工作原理:在 PCR 反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个 PCR 进程。随着 PCR 扩增的进行,每经过一个循环,荧光信号就会相应增加。通过检测荧光信号的变化,就可以判断 DNA 的扩增情况,进而实现对初始模板的定量分析。常用的荧光化学物质有 TaqMan 荧光探针和 SYBR 荧光染料等。TaqMan 探针法中,探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR 扩增时,Taq 酶的 5’-3’外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号。SYBR Green Ⅰ 法中,SYBR 荧光染料特异性地掺入 DNA 双链后,发射荧光信号,而不掺入链中的 SYBR 染料分子不会发射任何荧光信号,从而保证荧光信号的增加与 PCR 产物的增加完全同步。南京CY3荧光定量PCR仪功能