微型数字ELISA使用效果

参考原理：血液中单个蛋白质分子的检测有助于识别许多新的诊断性蛋白质标记物。我们报告了一种同时检测数百至数千个单独蛋白质分子的方法，该方法能够检测到非常低浓度的蛋白质。蛋白质被捕获在显微珠上，并用酶标记，每个显微珠上有一个或零个酶标记的蛋白质。通过将这些显微珠分离成50飞米的阵列反应室，单个蛋白质可以通过荧光想象检测到。通过单化这些阵列中的分子，~10-20种酶可以在100μL（~10−19M）中检测到。单个基于酶标记的分子酶联免疫吸附试验（数字ELISA)能够检测血清中临床相关的蛋白质，其浓度（<10−15M）远低于传统ELISA3-5。数字ELISA在所有接受防冶性前列腺切除术的患者血清中检测到前列腺特异性抗原，比较低至14fmol/mL（0.4fmol）。

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每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测

人类形式的蛋白质被加入到25%牛血清中以代替临床测试样本；通常使用四倍稀释因子以减少免疫测定中的基质效应4。使用数字ELISA检测25%血清中的PSA，从该实验中确定了LOD为~50aM（1.5fg/mL），相当于整个血清中的LOD为~200aM（6fg/mL）。检测到的比较低浓度为250aM，相当于25%血清中的1fMin全血清。由于LOD是通过外推背景浓度来确定的加上背景的三个标准差，不同运行的LOD取决于背景的CV。在具有典型背景方差的几个实验中，全血清PSA的亚飞摩尔LOD得以保持。相比之下，一种前列的商业PSA检测方法(ADVIACentaur，西门子）报告在人血清中的LOD为3pM（0.1ng/mL），并且已经报道了LOD在10-30fM17,26。 微型数字ELISA使用效果芯弃疾JX-8B单分子ELISA检测产品，10ul样本可同时测2-4个指标！

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参考的其他高灵敏检测方法：

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为了证明检测极低浓度的可能诊断价值使用数字ELISA检测血液中的蛋白质，对接受治理性前列腺切除术（RP）的患者血清样本中的PSA进行了测量。PSA是前列腺病的血清生物标志物病症既用作筛查工具，也用于监测住院患者的复发接受治理性前列腺切除术28。治理性前列腺切除术后，绝大多数PSA被消除，水平低于标准商用检测方法的检测限（3pM或0.1ng/mL)。定期监测这些患者的PSA恢复情况可以检测前列腺病的复发，但术后几年内生化复发可能不会被发现。 芯弃疾JX-8B单分子普惠化ELISA检测产品，微量检测，使用微量样本就能测试；

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使用创新的fg级超敏免疫检测simoa单分子产品原理；只强度变化的单个信号二维离散化、阵列单分散排布，形成数万个荧光信号；将传统的模拟信号转化为新型的数字化信号；创新型原理，有效提高检测灵敏度，可达fg/aM级！

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我公司推出的数字化高灵敏ELISA芯片检测产品应用场景：适合生物实验室、医学实验室、科研市场、产品预研、产品开发、ELISA检测、动物病情检测等各种应用场景应用范围：各种高灵敏多重免疫检测，可替代各种ELISA试剂盒，及其他免疫检测产品。

根据目标蛋白的抗体制备了功能化的微球生产商说明。含有目标蛋白的100-μL测试溶液与200,000个磁珠悬浮液孵育2小时至23°C。然后将磁珠分离并用PBS和0.1%Tween-20洗涤三次。磁珠重新悬浮后与含有检测抗体（通常约为1nM)的溶液孵育45分钟。在23°C下最小值。然后将珠子分别用PBS和0.1%洗涤三次。Tween-20。将珠子与含有SβG（1–50pM)的溶液在23°C孵育30分钟，然后分离并在PBSand0.1%Tween-20中洗涤六次。随后将珠子重悬于10μLofPBS中，并加载到飞升液位阵列中。整个实验的总时间约为~6小时。 微型数字ELISA使用效果