西藏动物模型手术

曾为国内、外医药企业做过多个药物的临床前药理研究，研发产品已成功上市。在中国工作期间参加完成10项课题，在美国参与完成了NIH(NationalInstitutesofHealth)及AHA(AmericanHeartAssociation)的多个基金项目。发表学术论文60余篇，曾获得省部级一、二等科技奖7项。在学术期刊如Nature,ProceedingsoftheNationalAcademyofSciences,JournalofClinicalInvestigation,Circulation,CirculationResearch,Cell,NatureCommunications,NatureMetabolism,ScienceTranslationalMedicine发表多篇论文。手术疾病模型精选案例1.心肌梗死模型（左冠状动脉结扎术）与缺血再灌注损伤模型2.主动脉弓缩窄3.慢性心力衰竭模型赛业生物可提供的小动物手术疾病模型及相关服务心脑血管系统手术心肌梗死模型（左冠状动脉结扎术）心脏缺血再灌注损伤模型主动脉弓缩窄术(TAC)升主动脉缩窄术腹主动脉缩窄术（模型）心力衰竭模型肺动脉高压模型大脑中动脉栓塞。脂多糖（LPS）联合烟熏法致慢性阻塞性肺部疾病小鼠模型。西藏动物模型手术

所述外显子序列为第3外显子序列。进一步地，在本发明的一些实施方案中，利用cre-loxp基因敲除技术敲除gm20541基因上的第3外显子序列。上述敲除策略是采用cre-loxp敲除技术敲除gm20541基因。但在其他的实施例中，实现基因敲除的技术手段有很多，例如crispr/cas9技术、人工核酸酶介导的锌指核酸酶技术(zinc-fingernucleases，zfn)、转录因子样效应物核酸酶技术(transceriptionactivator-likeeffectornucleases,talen)等。因此，在其他的实施例中采用crispr/cas9技术或其他的技术手段敲除gm20541基因，也是属于本发明的保护范围。进一步地，在本发明的一些实施方案中，所述目标动物为哺乳动物。进一步地，在本发明的一些实施方案中，所述哺乳动物选自小鼠、大鼠、狗、猪、猴以及猿中的任意一种。需要说明是，本发明所述的目标动物并不限于上述的动物，其他类型的哺乳动物也是可行，无论选用何种动物，只要是具有gm20541基因或其同源基因的动物，均可作为本发明所述构建方法中的目标动物，在其前体细胞中敲除gm20541基因，使其表现出视网膜色素变性性疾病特征，作为视网膜色素变性疾病模型，这也是属于本发明的保护范围。第二方面。西藏动物模型手术人类疾病的动物模型是指各种医学科学研究中建立的具有人类疾病模拟表现的动物。

缺点：该移植模型的原发出现与转移发生之间时间间隔短，不利于药物药效研究;且细胞为鼠源，与人类有一定的差异。2异种移植模型异种移植模型是将人类的细胞或组织移植入免疫缺陷型实验动物体内。此模型一般采用免疫缺陷型小鼠，例如无胸腺裸鼠、CB17-SCID小鼠、NOD/SCID小鼠、NSG小鼠。一般来说，免疫缺陷程度越高，成瘤性越好。的相关研究中，人源细胞系异种移植(cell-line-derivedxenograft，CDX)模型和患者组织异种移植(patient-derivedxenograft，PDX)模型已得到广泛应用。CDX模型方法：将5×106的人A375黑色素瘤细胞皮下注射NOD/SCID小鼠腹侧的双侧，成功构建黑色素瘤CDX模型。PDX模型方法：有研究者将93个新鲜的患者组织切成2×2×2mm3碎片的大小，皮下接种6周大的NOD/SCID雌性小鼠，建立PDX模型。优点：保留了病人的组织学和遗传学特征，可模拟溃疡状态对人类黑色素瘤预后的影响。缺点：此模型移植后的潜伏期长，连续传代后鼠基质被人类基质替代，移植率可变，免疫系统受损，有移植物抗宿主病的可能性以及某些免疫细胞功能的缺乏。三、转基因小鼠模型可以通过异位表达基因，引入特定的致突变或灭活抑制基因来对小鼠进行转基因黑色素瘤模型的构建。

brain：脑组织；liver：肝脏；retina：视网膜，intestine：肠；muscle：肌肉；heart：心脏；kidney：肾脏；spleen：脾；b：图1中a的统计结果；c:westernblot检测gm20541蛋白在不同组织的表达；d:图1中c的统计结果。图2：gm20541基因敲除小鼠的构建路线；图中sixko或cko表示gm20541基因敲除纯合子小鼠；ctr是指野生型；het是指杂合子。图3：中长距离pcr鉴定子一代鼠的结果；图中：a：扩增5’端长臂使用引物对gm5’lrf和sa3’r,扩增产物为；其中a2,3,6,9,10,b1为阳性；b：扩增3’端长臂使用引物对neof和gm3’lrr，扩增产物为。其中：a2,3,6,9,10,b6,9,es1g,es2g为阳性杂合子，+/+为野生型对照。图4：gm20541基因敲除小鼠的鉴定；a：gm20541基因敲除小鼠的基因型鉴定结果；b：实时定量pcr实验分析gm20541敲除小鼠视网膜中基因敲除效率，证明gm20541在敲除小鼠视网膜中不再表达；sixko或cko表示gm20541基因敲除纯合子小鼠；ctr是指野生型；het是指杂合子。图5：暗适应视网膜电图(electroretinogram,erg)检测结果；图中：a-c：不同光强下gm20541基因敲除小鼠的暗适应视网膜电图轨迹图；d：不同光强下gm20541基因敲除小鼠的暗适应视网膜电图a波统计。C57BL/6成年鼠肺部通过呼吸机过量通气损伤模型的建立；

首先，预实验必须要当做正式实验来对待（态度要放端正，这是必须的）。预实验的每一步都需要详细规划，多方筹谋。不论是实验动物的选择，还是检测试剂的购买，都尽量和正式实验统一标准。建议大家先把所有试剂和药物购买完毕后，再去购买实验动物。因为动物会长胖，长胖后给药剂量就要增加，不*多花钱，并且还容易影响实验效果。笔者曾经提前将实验动物买回，但因为特殊原因没能购买到造模药物，终只能忍痛割爱将动物赠送他人，白白亏了一笔血汗钱（那批老鼠在我这儿白吃白喝长得太胖，没办法用作造模）。动物及试剂购买首先需要考虑：实验动物品种、体重、性别、周龄（通常根据既往文献报道可以获得答案）、数量（需要考虑到实验有一定动物死亡率或者动物本身会打架互殴，因此需要提前购买足够的动物）。动物购买的途径、安置的地点，饮食管理（一般实验室会有动物房，也可以从其他地方购买），动物免疫证明、伦理证明需要提前准备好。实验相关的试剂和药物：比如造模药物和器械，动物干预所需药物，阳物选择及购买（有些药物购买很困难，必须通过特殊程序才能买到）。如果涉及到有创操作，要提前准备好物（建议提前购买），手术器械。需要了解自身实验平台能完成哪些技术。盐酸阿霉素诱导心衰小鼠模型。西藏动物模型手术

胆管结扎致肝胆管性肝硬化大鼠模型。西藏动物模型手术

痉挛型脑性瘫痪(SCP)大鼠模型【目的】痉挛型脑性瘫痪(SCP)大鼠模型建立【动物】SPF级SD大鼠，雄性，周龄6~8W，体重：200~250g【方法】1、大鼠麻醉，颅顶脱毛备皮；2、大鼠脑定位仪固定大鼠，颅顶正中切口，长度约2cm开口暴露前囟及矢状缝；3、缝线将皮肤左右分开固定，前囟后10mm、矢状缝左侧；4、微量注射器移至开孔处修正骨孔，注射器垂直向颅内插入，缓慢注射无水乙醇15ul，注射完移除注射器，棉球压迫止血；5、缝合创口后维持25°体温，等待苏醒，观察大鼠状态。【观察】术后3天模型大鼠摄食减少、右侧肢体跛行、右前肢不负重、右前肢及右前爪屈曲痉挛明显，顺时针绕圈前行，2周后症状减轻，大鼠于术后4周开始给予动物行为学观察【检测】HE检测对比观察脑组织是否出现细胞水肿,排列不规则,结构紊乱,核固缩,染色体分布不均匀,变性坏死,核糖体消失,白质软化灶和空囊形成,小胶质细胞浸润,星形胶质细胞肥大、增生等病理表现。旷场测试（OpenFieldTest）：实验用于评估大小鼠的活动性和探索性行为。动物被放置在一个较大的开放性场地内，然后记录它们的运动轨迹和停留时间。用来评估动物的活动性、焦虑程度、压力反应等。水迷宫测试。西藏动物模型手术