苏州结核PCR技术在动物疫病检测的应用

巧亦捷（ingeNova）是翊新诊断技术（苏州）有限公司旗下专注于动物体外诊断检测的产品品牌，以翊新诊断全资子公司——苏州翊创生物科技有限公司为主体。巧亦捷系列产品覆盖了猫呼吸道疫病检测、猫消化道疫病检测、犬消化道疫病检测、寄生虫等宠物核酸检测，非洲猪瘟、蓝耳等猪病核酸检测，牛逼支、牛腹泻等牛羊类食品动物的核酸检测，人畜共患病核酸检测，以及鱼虾等水生动物的核酸检测。全自动薄膜微流控核酸检测一体机是巧亦捷系列产品的主打检测平台，巧亦捷基于此平台技术致力于为客户提供快速、精确的动物疫病诊断整体解决方案。依托先进的薄膜微流控技术开发一体化、智能化的快速、便捷的POCT体外分子诊断解决方案。针对动物疫病的早期诊断，公司以市场需求为出发点，开发出了低成本、无污染、能够实现真正意义上“全自动，全封闭，样本进，结果出”的薄膜微流控芯片技术和可以用于动物疫病现场快速诊断的分子检测系统，从而为动物疫病的现场诊断提供更加便利的检测手段。目前已开发非洲猪瘟检测、宠物呼吸道多联检测、宠物消化道多联检测等多种试剂及检测方案。巧亦捷核酸检测解决方案包括全自动便携式核酸检测一体机、免核酸提取检测试剂盒。苏州结核PCR技术在动物疫病检测的应用

PCR的工作原理：在TaqDNA聚合酶（热稳定DNA聚合酶）的作用下，由一对特异性引物经热变性-退火-延伸反应，三个不同温度的循环处理使得DNA由少量扩增到多量的一种体外DNA扩增技术。在反应体系内，以一对人工合成的寡核苷酸作为扩增引物，第一步，模板DNA变性，以构成脱氧核糖核酸的四种脱氧核苷酸为底物，目的基因作为模板，在DNA聚合酶的作用下模板DNA经过80-90℃高温变性，使模板DNA双链经PCR扩增形成的双链解离成单链。第二步，模板DNA与引物退火（复性），模板DNA解离成单链后温度降至50-60℃，引物与模板DNA单链互补配对。第三步，引物的延伸，DNA模板-引物结合物在DNA聚合酶作用下，70-75℃以dNTP为反应原料半保留复制合成一条新的模板DNA链。这三个步骤为一个循环，2-4分钟即可完成一个循环，2-3小时就能使极微量的DNA、片段、甚至单拷贝基因复制到几百万倍，从而实现对靶DNA的放大。由于扩增碱基序列按照靶DNA复制，因此PCR反应具有高度特异性。苏州结核PCR技术在动物疫病检测的应用PCR技术是一种用于扩增特定DNA、片段的分子生物学技术。

绝大多数PCR检测的操作分为：样本采集→样本处理→核酸提取→上机检测四个步骤，在样本的存放和处理，特别是核酸的提取和扩增过程中，很容易造成PCR实验室的污染，从而造成结果假阳。巧亦捷核酸检测一体机全自动核酸提取，手工操作时间极短：将样本置于薄膜囊袋中进行核酸的释放和扩增，一步直达，短时间出结果。既减少了核酸提取的工作量，缩短了检测时间，又极大降低了污染发生的几率。**小化人为干预带来的操作误差，降低污染的可能性。是市面上自动化程度比较高的多重病原体解决方案。

巧亦捷（ingeNova）是翊新诊断技术（苏州）有限公司旗下专注于动物体外诊断检测的产品品牌，以翊新诊断全资子公司——苏州翊创生物科技有限公司为主体。巧亦捷系列产品覆盖了猫呼吸道疫病检测、猫消化道疫病检测、犬消化道疫病检测、寄生虫等宠物核酸检测，非洲猪瘟、蓝耳等猪病核酸检测，牛逼支、牛腹泻等牛羊类食品动物的核酸检测，人畜共患病核酸检测，以及鱼虾等水生动物的核酸检测。全自动薄膜微流控核酸检测一体机是巧亦捷系列产品的主打检测平台，巧亦捷基于此平台技术致力于为客户提供快速、精确的动物疫病诊断整体解决方案。翊新诊断技术（苏州）有限公司由微流控技术领域国际**周朋博士创立。公司依托先进的薄膜微流控技术开发一体化、智能化的快速、便捷的POCT体外分子诊断解决方案。针对动物疫病的早期诊断，公司以市场需求为出发点，开发出了低成本、无污染、能够实现真正意义上“全自动，全封闭，样本进，结果出”的薄膜微流控芯片技术和可以用于动物疫病现场快速诊断的分子检测系统，从而为动物疫病的现场诊断提供更加便利的检测手段。目前已开发非洲猪瘟检测、宠物呼吸道多联检测、宠物消化道多联检测等多种试剂及检测方案。PCR在常见传染病、**、遗传病、寄生虫病、优生优育、法医学等领域中有相当高的实际应用价值。

巧亦捷核酸检测一体机的特异性及灵敏度可达99%以上，使用的PCR荧光探针技术不但可以检测出病毒的种类，更可以检测出样品里100个/ul数量级的病毒数量，可谓特异性极强，准确度极高！若检测出有病毒，但没有发病也要引起重视，因为检测的病毒是一些对动物机体伤害极大的病毒，或者是人畜共患病，虽然现在没有发病，并不表明以后不会发病，如果任其在体内发展，等到病毒繁殖到一定的数量后，或者机体的抵抗力突然下降，也许就会发生灾难性的爆发，对动物造成极大的伤害。在宠物医疗中，目前病毒检测主要包括胶体金检测（试纸）和PCR检测。苏州结核PCR技术在动物疫病检测的应用

宠物传染病检测技术方面，核酸检测方法具有极高的灵敏度和特异性，可很大程度缩短传染病检测的窗口期。苏州结核PCR技术在动物疫病检测的应用

巧亦捷核酸一体机采用的探针法荧光PCR与常规PCR的不同之处在于：在上、下游引物外还加入了具有序列特异性的探针（探针本身具有荧光标记），该探针根据需要扩增的靶序列设计因此只能与待检测序列结合，与染料法相比提高了实验的特异性。目前市场上的探针主要种类有：TaqMan、MolecularBeacon、Scorpions、Hybirdization等，其中以TaqMan探针应用宽泛。TaqMan探针的结构：长度与普通PCR引物类似，大约20bp左右。在5’与3’端各标记有一个荧光基团，5’的荧光基团称为报告基团（Report），3’的荧光基团称为淬灭基团（Quencher）。TaqMan探针的性能：在探针结构完整的情况下用特定的波长激发报告基团，由于报告基团与淬灭基团的空间位置很近，因此报告基团能够通过FRET（FluorescenceResonanceEnergyTransfer）将接受的能量转移到淬灭基团，使后者以发射荧光或热量的方式释放能量，而报告基团并不发射特定波长的荧光信号。苏州结核PCR技术在动物疫病检测的应用