PCR荧光检测

现如今，大多数宠物医院还是使用胶体金方法对宠物疾病病原体进行检测，而此种检测方法准确性低，灵敏度不高，通常出现检测结果不准确而导致宠物误诊。如果是误诊，宠物则无法得到很好的诊疗，甚至会死亡。巧亦捷在宠物病原体核酸检测试剂系列中应用了PCR-荧光探针法，在PCR反应体系中加入特异的荧光探针，在实验条件下对宠物病原体特异性基因片段进行扩增，根据荧光强度的变化进行检测，并针对各种样品进行了反应体系的优化，灵敏度可达1000个拷贝，具防污染功能，特别适合在宠物医院使用。本产品操作简便，简单培训即可掌握操作方法。宠物医疗服务包括为宠物提供疾病诊疗和日常保健服务，是宠物行业中*次于宠物食品的第二大细分行业。PCR荧光检测

每个生物体（包括病原微生物）都含有自己的基因，通过对某种生物的基因信息进行分析可以用来识别和区分不同的物种，甚至可以用来区分不同的个体（比如我们在犯罪大片里经常见到的通过DNA分析来抓凶手，再比如亲子鉴定）。传染病诊断也类似于刑侦，就是在患者的样本中查找引起症状的元凶——病原微生物。那么同样可以通过分析样本中是否含有某种病原微生物的基因来实现诊断。PCR就是通过样本中的基因信息进行分析，某一种病原体的诊断试剂只会去捕捉该病原体的基因，并对其进行大量扩增。如果扩增可以发生，则结果呈阳性，也就是有这种病原微生物存在。PCR荧光检测传染病是由某些具有致病性的微生物，如细菌、病毒等引起的，能够在某种动物或多种动物之间传播的一些疾病。

市面上现有PCR仪器都有以下几个弊端：1.由于PCR灵敏度极高，实际应用中污染较严重，一旦有少量外源性污染就可出现假阳性结果。2.条件控制不当会造成各种产物突变，从而降低特异性和灵敏度。3.PCR技术需要以已知DNA模板作为扩充模板，必须知道引物的结合部位序列才能合成特异性引物，局限性较大。巧亦捷核酸一体机采用薄膜微流控技术，检测过程为全封闭且自动进行核酸提取及PCR扩增，无需高标准的检测环境，可很大程度上降低污染。结果快速、准确且稳定。

PCR检测技术以灵敏度高，稳定性强为优势深受兽医师的青睐，以常见的猫传腹为例：猫传腹是由猫肠冠状病毒的突变引起。猫传腹为分干性和湿性两种。如果不用PCR技术的话，干性和湿性传腹均不好确诊。但如果采用PCR技术，抽取患猫腹腔或胸腔积液进行检测，约45分钟就可以确诊是否是湿性猫传腹。而针对于干性传腹，大多数病猫会呈现淋巴结肿大。所以也可以通过PCR技术检测淋巴结的穿刺液来确诊。PCR技术在猫传腹方面的应用极大缩短了确诊的时间，从而争取到更多的诊疗时间，患猫生存的机会也就更大。巧亦捷核酸一体机的检测项目范围很广，像猫瘟、猫鼻气管炎、猫上呼吸道的各类症状、犬流感、犬瘟、犬细小、犬呼吸道和肠道的疾病、狂犬病等多种疾病均可以快速确诊，为诊疗争取了更多的时间。传染病诊断也类似于刑侦，就是在患者的样本中查找引起症状的元凶——病原微生物。

巧亦捷核酸一体机采用的探针法荧光PCR与常规PCR的不同之处在于：在上、下游引物外还加入了具有序列特异性的探针（探针本身具有荧光标记），该探针根据需要扩增的靶序列设计因此只能与待检测序列结合，与染料法相比提高了实验的特异性。目前市场上的探针主要种类有：TaqMan、MolecularBeacon、Scorpions、Hybirdization等，其中以TaqMan探针应用宽泛。TaqMan探针的结构：长度与普通PCR引物类似，大约20bp左右。在5’与3’端各标记有一个荧光基团，5’的荧光基团称为报告基团（Report），3’的荧光基团称为淬灭基团（Quencher）。TaqMan探针的性能：在探针结构完整的情况下用特定的波长激发报告基团，由于报告基团与淬灭基团的空间位置很近，因此报告基团能够通过FRET（FluorescenceResonanceEnergyTransfer）将接受的能量转移到淬灭基团，使后者以发射荧光或热量的方式释放能量，而报告基团并不发射特定波长的荧光信号。巧亦捷全自动核酸检测一体已实现覆盖猫、犬肠道类、呼吸道类、血液类、人畜共患类等多种病原体的诊断。PCR荧光检测

分子诊断技术大致划分为PCR技术、分子杂交、基因测序、核酸质谱、生物芯片5大类。PCR荧光检测

市面上一般的实时荧光PCR检测过程：待检样品通过DNA提取试剂盒提取DNA。样本制备完成后，进行荧光定量PCR扩增。Ct值由实时荧光PCR仪软件自动确定。此法需要配置实时荧光PCR仪，这对中小型宠物医院、兽医站等来说，是一笔不小的负担：且操作需要更专业的技术人员。巧亦捷针对此产品痛点特推出薄膜微流控核酸检测一体机，集核酸提取、PCR扩增为一体，无需专业实验室、无需专业检测人员，真正实现了“样本进，结果出”，大部分检测项目可在30~70分钟内完成，检测快速、结果准确。PCR荧光检测