培养基的灭菌:一般培养基可采用121°C高压蒸汽灭菌15分钟的方法。在各种培养基制备方法中,如无特殊规定,即可用此法灭菌。某些热敏成分,如糖类,应另行配成20%或更高的浓液,以过滤或间歇灭菌法消毒,以后再用无菌操作技术、定量加于培养基。明胶培养基亦应用较低温度灭菌。血液、体液和等则应以无菌操作技术抽取和加入于经冷却约50°C左右的培养基中。琼脂斜面培养基应在灭菌后立即取出,冷至55℃-60℃时,摆置成适当斜面,待其自然凝固。培养基长时间的高温灭菌会使某些不耐热的物质破坏,如使糖类物质形成氨基糖、焦糖。海南大容量 培养基制备仪
培养基的类型-根据培养基的用途来区分,可分为选择培养基、增殖培养基、鉴别培养基等。1)选择培养基在培养基中加入某种物质以杀死或抑制不需要的菌种生长的培养基,称之为选择培养基。如链霉素、氯霉素等抑制原核微生物的生长;而制霉菌素、灰黄霉素等能抑制真核微生物的生长;结晶紫能抑制革兰氏阳性细菌的生长等。2)增殖培养基在自然界中,不同种的微生物常生活在一起,为了分离我们所需要的微生物,在普通培养基中加入一些某种微生物特别喜欢的营养物质,以增加这种微生物的繁殖速度,逐渐淘汰其它微生物,这种培养基称为增殖培养基,这种培养基常用于菌种筛选和选择增菌中。在某种程度上讲,增殖培养基也是一种选择培养基。3)鉴别培养基在培养基中加入某种试剂或化学药品,使难以区分的微生物经培养后呈现出明显差别,因而有助开快速鉴别某种微生物。海南大容量 培养基制备仪一般培养基在受热、吸潮后,易被细菌污染或分解变质,因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。
消毒与灭菌的区别:消毒指使用较为温和的物理或化学方法单杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)。消毒方法常用煮沸消毒法,巴氏消毒法(对于一些不耐高温的液体)还有化学药剂(如酒精、氯气、石炭酸等)消毒、紫外线消毒。灭菌则是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子。灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。灭菌方法:①接种环、接种针、试管口等使用灼烧灭菌法;②玻璃器皿、金属用具等使用干热灭菌法,所用器械是干热灭菌箱;③培养基、无菌水等使用高压蒸汽灭菌法,所用器械是高压蒸汽灭菌锅。④表面灭菌和空气灭菌等使用紫外线灭菌法,所用器械是紫外灯。
分接触和利用培养基中的养料,适于作生理等研究,由于发酵率高,操作、方便,也常用于发酵工业。(3)半固体培养基。是在液体培养基中加入少量凝固剂而呈半固体状态。固体培养基的制作步骤:1、首先我们要准备好一个装有1000ml的烧杯,然后在准备好的杯中在放入500ml的蒸馏水,在将牛肉膏和蛋白胨、氯化钠这些都溶解在水中。2、其次我们在调节PH值,调节时需要百分之10的氢氧化钠溶液,将PH值调到7.2,在此也要定容到1000ml,较后在将这些液体都分别放入10个锥形瓶内,每一瓶都装100ml。培养基通常采用高压蒸汽灭菌。
含琼脂的培养基有时在平板上不凝固或凝固不好问题:在此种情况下,建议对于需要高压灭菌的培养基,倒入平板前先摇一摇。主要是琼脂培养基的分子量比较大,在冷却过程中容易沉淀到底,造成琼脂不能均匀分布。对于无需高压灭菌的培养基,不能直接煮沸溶解后倒入平板、需要重复三至五次煮沸溶解过程,因一次无法保证琼脂完全溶解。微生物培养基成分中含有染料或指示剂;不同批次的粉状培养基含水量不同。一般要求≤6。含水量越高,颜色越深;研磨时间越长,颜色越深等三个原因。异养微生物的合成能力较弱,不能以CO2作为碳源或主要碳源,故应在培养基中至少添加一种有机物。海南大容量 培养基制备仪
在配制培养基时应尽量利用廉价且易于获得的原料作为培养基成分。海南大容量 培养基制备仪
固体斜面培养基配制步骤:1、培养基配方的选定同一种培养基的配方在不同著作中常会有某些差别。因此,除所用的是标准方法,应严格按其规定进行配制外,一般均应尽量收集有关资料,加以比较核对,再依据自己的使用目的,加以选用,记录其来源。2、培养基的制备记录:每次制备培养基均应有记录,包括培养基名称,配方及其来源,和各种成份的牌号,较终pH值、消毒的温度和时间制备的日期和制备者等,记录应复制一份,原记录保存备查,复制记录随制好的培养基一同存放、以防发生混乱。3、培养基成分的称取:培养基的各种成分必须精确称取并要注意防止错乱,较好一次完成,不要中断。可将配方置于傍侧,每称完一种成分即在配方面军做出记号,并将所需称取的药品一次取齐,置于左侧,每种称取完毕后,即移放于右侧。完全称取完毕后,还应进行一次检查。海南大容量 培养基制备仪
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