培养基各成份的混合和溶化:培养基所用化学药品均应是化学纯的。使用的蒸煮锅不得为铜锅或铁锅,以防有微量铜或铁混入培养基中,使细菌不易生长。好好使用不锈钢锅加热溶化.也可放入大烧杯或大烧瓶中置高压蒸汽灭菌器或流动蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在锅中溶化时、可先用温水加热并随时扰动,以防焦化、如发现有焦化现象、该培养基即不能使用,应重新制备。待大部分固体成分溶化后,再用较小火力使所有成分完全溶化.迄至煮沸。如为琼脂培养基,应先用一部分水将琼脂溶化,用另一部分水溶化其它成分,然后将两溶液充分混合。在加热溶化过程中,因蒸发而丢失的水分,较后必须加以补足。制备培养基的操作要点:液体培养基所配制的培养基是液态的。广西高速分装机
马铃薯培养基的分装:1.根据需要将培养基分装于不同容量的三角烧瓶、试管中。分装的量不宜超过容器的2/3以免灭菌时外溢。2.琼脂斜面分装量为试管容量的1/5,灭菌后须趁热放置成斜面,斜面长约为试管长的2/3。3.半固体培养基分装量约为试管长的1/3,灭菌后直立凝固待用。4.高层琼脂分装量约为试管的1/3,灭菌后趁热直立,待冷后凝固待用。5.液体培养基分装于试管中,约是试管长度的1/3。6.琼脂平板:将灭菌(或加热融化)后的培养基冷至50℃左右,以无菌手续倾人灭菌平皿内,内径225px的平皿倾注培养基约13~15ml,轻摇平皿底,使培养基平铺于平皿底部,待凝固后即成,倾注培养基时,切勿将皿盖全部启开,以免空气中尘埃及细菌落入新制成的平板培养基(简称平板),表面水分较多,不利于细菌的分离,通常应将平皿倒扣搁置于37℃培养箱内约30分钟待平板平面干燥后使用。广西高速分装机液体培养基,固体培养基的对应词,是微生物或动植物细胞的液状培养基。
培养基的分装:培养基的分装,应按使用的目的和要求,分装于试管、烧瓶等适当容器内。分装量不得超过容器装盛量的2/3。容器口可用垫有防湿纸的棉塞封堵,其外还须用防水纸包扎(现试管一般多有用螺旋盖者)。分装时好好能使用半自动或电动的定量分装器。分装琼脂斜面培养基时,分装量应以能形成2/3底层和1/3斜面的量为洽当。分装容器应预先清洗干净并经干烤消毒,以利于培养基的彻底灭菌。每批培养基应另外分装20ml培养基于一小玻璃瓶中,随该批培养基同时灭菌,以为测定该批培养基好终pH之用。
全自动培养基制备分装系统:1.一键选择培养皿类型;整合数据库,预设培养皿尺寸选择程序。2.全自动程序,无人值守;分装过程无需人工干预。3.运行过程顺滑无声;大程度的削减了噪音。4.铝制表面光滑平坦;易于清洁,无孔隙和裂缝,以防培养基流进去。5.两个存储器;存储器高度可选;220或440个培养皿(高为16.5mm的培养皿)预装培养皿方便;旋转存储器,可整个从Mediafill上取走,方便预装培养皿。6.整合蠕动泵(主泵);*确分装培养基。7.整合蠕动泵(附加剂泵);*确添加附加剂(可选)。8.一体化控制;主机和选配件(附加剂泵)可通过Mediafill触摸屏一起控制。培养基各成份的混合和溶化:培养基所用化学药品均应是化学纯的。
配制好的培养基保存:灭菌以后培养基应该迅速冷却至所需温度,避免长时间保存在灭菌锅内,造成过度灭菌,影响培养基的营养成分或选择性效果。所配制的培养基的量,应该是在较长保存期限内正好使用完。含染料的培养基应闭光保存;倒好的琼脂平板如果配制的当天未使用完,应于冷藏保存,如果保存时间超过2天,应将其放入密封的塑料袋中保存;配好的肉汤类培养基如果保存时间超过2个星期,应将其放在带有螺旋盖的试管或其它密闭的试管或容器中防止蒸发。要根据不同微生物的营养需求选择适宜的营养物质,配制针对性强的培养基。广西高速分装机
液体培养基具有进行通气培养、振荡培养的优点。广西高速分装机
培养基的过滤澄清:液体培养基必须较全澄清,琼脂培养基也应透明无明显沉淀,因此,须要采用过滤或其它澄清方法以达到此项要求。一般液体培养基可用滤纸过滤法,滤纸应拆叠成折扇成漏斗形,以避免因液压不均匀而引起滤纸破裂。琼脂培养基可用清洁的白色薄绒布趁热过滤。亦可用中间夹有薄层吸水棉的双层纱布过滤。新制肉、肝、血和土豆等浸液时、则须先用绒布将碎渣滤去,再用滤纸反复过滤。如过滤法不能达到澄清要求、则须用蛋清澄清法。即将冷却至55-60℃的培养基放入大的三角烧瓶内,装入量不得超过烧瓶容量的1/2,每1000ml培养基加入1-2个鸡蛋的蛋白.强力振摇3-5分钟,置高压蒸汽灭菌器中、121℃加热20分钟、取出趁热以绒布过滤即可。广西高速分装机
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