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点击序列可以查看区域内的可用酶切位点。我们可以看到所有酶切位点中，在我们实验室有的酶又不会把基因切碎的酶*有Nde1,EcoR1,而Pst1不在载体的酶切位点上，所以排除。这里我们选择双酶切法，所以选择了Nde1,EcoR1两个位点，其中Nde1在前，EcoR1在后-生命科学软件查看可以插入的酶切位点后，返回到目的基因的DNA文件。点击primerforward序列，点击Insertions,***列绿色方框不要管，这个方框是用来添加氨基酸，在构建载体过程不需要调整。把第二列红色方框改成***个酶切位点基因Nde1,然后点击insert.并在前面添加G或者C为保护碱基（也可以网络查询适用的保护碱基）。-生命科学软件。生物软件,会用这个就够了!江苏数据可视化处理生命科学软件多少钱

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特征-生命科学软件。DNA可视化查看DNA序列的多个视图地图：自定义，酶位点，特征，引物，ORF，DNA颜色等的显示。地图可以是圆形或线性格式。序列：使用双链模式查看酶位点，具有翻译，引物和DNA颜色的特征。单链模式显示具有彩色特征的紧凑概览。酶：从一系列酶组中选择。剪切网站可以显示为数字或行，按名称或频率排序。-生命科学软件。特征：按名称、位置、大小、颜色，方向性或类型对带注释的要素列表进行排序。复选框在紧凑或完全展开的显示之间的切换。生命科学软件-生命科学app下载。

点击Actions→InsertFragment，点击HindIII+键盘Shift键+ApaI，点击Insert，在sourceoffragment处选择插入的目的片段来源。点击上述同样的酶，给该重组质粒命名，点击clone。-生命科学软件引物设计及模拟克隆-生命科学软件以pEGFP-C1构建humanp53CDS过表达载体为例，通过酶切位点筛选，选择“EcoRI”和“BamHI”两种内切酶，其中需要注意的是：EcoRI在上游，BamHI在下游按照之前步骤，用snapgene打开p53CDS序列选择底部“Sequence”页面生命科学新版下载-生命科学app。江苏数据可视化处理生命科学软件多少钱

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得到的结果如下图所示。下图中显示的酶是能够切断目的基因的酶，因此要排除。所以我们剩下的可以选择的酶包括Nde1,EcoR1,Pst1共3种酶。下一步打开载体DNA文件。-生命科学软件打开载体以pGADT7AD为例，查看切入位点的酶有哪些。在筛选的过程中还要注意酶切位点不能把基因切断。因此在选择酶切位点时候要保证两点。1.载体中多克隆位点中包含该限制性内切酶。2.目标基因可酶切的位置不包含该限制性内切酶。点击图中标记的地方MCS（多克隆位点）插入基因的位置。-生命科学软件。江苏数据可视化处理生命科学软件多少钱

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