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得到的结果如下图所示。下图中显示的酶是能够切断目的基因的酶，因此要排除。所以我们剩下的可以选择的酶包括Nde1,EcoR1,Pst1共3种酶。下一步打开载体DNA文件。-生命科学软件打开载体以pGADT7AD为例，查看切入位点的酶有哪些。在筛选的过程中还要注意酶切位点不能把基因切断。因此在选择酶切位点时候要保证两点。1.载体中多克隆位点中包含该限制性内切酶。2.目标基因可酶切的位置不包含该限制性内切酶。点击图中标记的地方MCS（多克隆位点）插入基因的位置。-生命科学软件。GraphPad生命科学软件是什么生命科学软件有哪些特点呢图片介绍。

Snapgene构建载体—酶切位点法-生命科学软件本文以拟南芥相关基因ATG7为例，打开Tair网页（专门的拟南芥基因库网站），找到基因那一栏，输入目标基因后得到结果。从图中可以看到描述这一栏写的这个基因的名称，其中就包括了ATG7。确认基因后点击目标基因。-生命科学软件找到SequenceRNAData：点击fulllengthCDS.打开页面后，复制全部序列。打开snapgene，点击newdnafile。黏贴复制文件，并重命名DNA文件，点击OK。选择全部序列后，点击Features>addfeature>labelname(CDS),type(CDS),点击OK。

showenzymes:显示酶切位点，下拉含有多个操作按钮，分别显示序列中不同个数的酶切位点，亦或者显示序列不含的酶切位点，深黑色的是单一的酶切位点，浅色的为多切位点，可快速查询酶及识别序列。-生命科学软件showfeatures：显示/隐藏功能序列，某些序列如果含有的功能片段较多，显得较为凌乱，可以点此操作。showtranslation：显示/预测翻译，显示序列可能的编码区（可下拉调整参数），该功能为预测功能，使用需要结合序列本身的特征或者对序列有一定的了解，也可借助此功能快速预测lncRNA、circRNA等潜在的编码区，十分实用！-生命科学软件use3letteraminoacidcodes：显示氨基酸密码子的呈现显示，如Asp—D转换。生命科学!SnapGene分子生物学软件。

载体构建——同源重组法-生命科学软件。还是以基因ATG7为例，首先在NCBI,TAIR等基因网站找到这个基因，复制CDS序列。将序列插入newdnafile，然后重命名文件。选中全长后，点击Features>addfeature>labelname改为CDS>type改为CDS。这样的目的是为了方便后续检测基因是否插入成功。查看实验室已有的酶，点击Emazy>chooseemazy>先移除右边框中的酶，然后再添加你所在实验室中已购买的酶。保存文件为ATG文件。后续要在载体中插入到这个文件所以要先保存。-生命科学软件。打开载体文件,找到到多酶切位点序列。查看哪些酶切位点可用且不会切到基因片段，然后确定酶切位点，可用一个酶，也可以用两个酶，不过比较好选两个酶。在载体文件中选择要两个酶切位点，点击Action>In-fusioncloning>Insertfragment。生命科学软件有哪些特点。GraphPad生命科学软件是什么

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将序列，图谱或凝胶图像转换为标准格式。将地图或模拟的穷糖凝胶导出为常见的图像格式。-生命科学软件与SnapGeneViewer共享数据只需将文件和链接发送到SnapGeneViewer。就像完整的SnapGene界面一样，收件人将能够看到图，序列和注释。-生命科学软件SnapGene6.1为克隆和可视化提供了新功能：亮点包括在模拟GoldenGateAssembly时简化的引物设计、用于ssRNA序列的新二级结构视图，以及在全部操作系统中支持黑暗模式。在提高移动速度的同时提高准确性，从而节省时间和金钱。GraphPad生命科学软件是什么

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