胎牛血清:胎牛血清(FBS),胎牛血清是一种性状、外观浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛;新牛血清取自出生24小时之内的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。1、性状、外观浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。2、蛋白质含量3.5%~5.0%(w/v)。3、血红蛋白含量≤0.02%(w/v)。4、无菌检验阴性。5、支原体检验阴性。6、细菌内的毒性≤5(EU/ml)。7、牛腹泻病毒阴性。8、大肠杆菌噬菌体阴性。9、支持细胞增殖(Sp2/0-Ag14)生长曲线(接种浓度)较大增殖浓度≥2.5×106个/ml,细胞倍增时间≤15h克隆率≥85%。胎牛血清是细胞培养中用量较大的天然培养基。温州优级胎牛血清品牌
胎牛血清:胎牛血清用于细胞培养已经超过半个世纪了,20世纪50年代末TheodorePuck在细胞和组织培养中初次加入胎牛血清(FBS)来刺激细胞生长。后来人们发现,由于胎牛未进食过母乳,所以IgG的含量极低,不会阻碍细胞生长,而且胎牛血清中含有丰富的促进细胞生长的成分,如维生素、运输蛋白、微量元素、生长因子等,胎牛血清生产的一切环节均有严格的质量把控。出厂的血清无细菌、支原体和病毒等微生物的威胁,且内的毒性含量低,满足绝大多数细胞培养需求。温州优级胎牛血清品牌反复冻融会破坏胎牛血清中有效成分,影响血清品质。
胎牛血清如何采取?在牛屠宰过程中,如发现母牛怀孕,就应立即将生殖系统从尸体中分离出来,在无菌条件下从子宫中取出小牛,进行脐带打结处理,清理羊水并消毒。在胎儿两肋之间直接插入一根针头到心脏,在真空的条件下,血液通过导管被抽入无菌的血液收集袋内。在没有真空泵时,也可将血液收集袋放在胎牛身体下面,通过重力作用或按摩方式进行收集。血液收集后,放在低温条件下凝集,经过离心去掉凝集物而获得血清。胎牛血清的获得量取决于胎儿的大小和年龄。胎儿至少3个月,否则会因心脏太小而不便于操作。一个3月龄的胎儿可产生150mL的血清;6月龄和9月龄的胎儿可分别产生350mL和550mL血清。
胎牛血清的意义:胎牛血清是采自5-8个月胎龄牛胚胎中的胎血,丰富的生长发育因子,胎牛血清非常适合各种细胞的培养,胎牛血清是细胞培养中重要的天然培养基,胎牛血清起到为细胞提供营养、支持、保护的作用。好的的胎牛血清是让细胞“快乐成长”的必备营养物,但劣质的胎牛血清,也可能会成为导致细胞死亡的“定时炸雷”。因此,挑选需要擦亮们的双眼。蛋白含量,总蛋白含量:胎牛血清一般范围是30-40mg/ml,数值偏高,可能说明牛龄偏大,不是胎牛;数值偏低,表明血清可能掺入水或者其他溶剂。血红蛋白含量:标准为不高于20mg/dl,颜色越红,数值越高;反之,数值越低。免疫球蛋白:免疫球蛋白的数值能侧面反映出时的牛龄情况,新生牛血清中容易检出IgM,IgG的含量也偏高,胎牛血清,不含IgM,IgG的含量也较低。细胞培养胎牛血清是不可或缺重要培养基。
胎牛血清应该如何保存,可以存放多久?胎牛血清可长期储存于-20℃冰箱中。倘若把胎牛血清存放在4℃冰箱,请不要超过一个月。如果一次性无法用完一瓶血清,建议将胎牛血清无菌条件下分装并储存于-20℃,避免反复冻融。如何正确地解冻胎牛血清?采用逐步解冻法,将胎牛血清从-20℃冰箱转入4℃冰箱融解,随后分装。切忌直接将胎牛血清从-20℃冰箱转移至室温解冻,这样很容易因为温度变化太大导致胎牛血清中的蛋白质凝集从而出现沉淀。胎牛血清应用比较普遍。温州优级胎牛血清品牌
热灭活目的是为了去除血清中补体等对热敏感的物质,但是在胎牛血清中对补体的灭活则明显没有必要。温州优级胎牛血清品牌
胎牛血清融化:胎牛血清在融化过程中,瓶子里冰块的底部你会看见亮亮的蛋白丝在下沉,如同蜂蜜溶于水时的亮线,这就是血清中大量的蛋白在快速融化,而水的熔点高于蛋白,融化的速度是比蛋白慢的。(回想一下高级冰淇淋和大棒冰的区别,你懂得!)试想,如果采用4℃过夜的方法,1瓶500毫升的血清融化好,大约需要10小时左右,蛋白先融化,沉降在瓶子的底部,水融化的速度比蛋白慢,于是造成大量蛋白溶于少量的水,此时就很容易有一些蛋白饱和析出,(大多是脂蛋白和纤连蛋白),这就是血清融化中产生沉淀的重要原因之一。温州优级胎牛血清品牌
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