胎牛血清应该如何保存,可以存放多久?胎牛血清可长期储存于-20℃冰箱中。倘若把胎牛血清存放在4℃冰箱,请不要超过一个月。如果一次性无法用完一瓶血清,建议将胎牛血清无菌条件下分装并储存于-20℃,避免反复冻融。如何正确地解冻胎牛血清?采用逐步解冻法,将胎牛血清从-20℃冰箱转入4℃冰箱融解,随后分装。切忌直接将胎牛血清从-20℃冰箱转移至室温解冻,这样很容易因为温度变化太大导致胎牛血清中的蛋白质凝集从而出现沉淀。胎牛血清是一种性状、外观浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。南京标准胎牛血清哪里有
胎牛血清:解冻胎牛血清时,请按照规定的的逐步解冻法(-20℃至4℃至室温),若胎牛血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃),实验显示非常容易产生沉淀物。解冻胎牛血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。请勿将胎牛血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,胎牛血清会变得混浊,同时胎牛血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害,而影响胎牛血清的质量。胎牛血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。若必须做胎牛血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。南京标准胎牛血清哪里有胎牛血清的蛋白质含量:3.5%~5.0%( w/v);血红蛋白含量 ≤ 0.02%( w/v)。
为什么要热灭活胎牛血清?胎牛血清加热可以灭活补体系统。开启的补体参与溶解细胞事件,刺激平滑肌收缩,细胞和血小板释放组胺,开启淋巴细胞和巨噬细胞。在免疫学研究,培养ES细胞,昆虫细胞和平滑肌细胞时,推荐使用热灭活胎牛血清。为什么储存在冰箱中的胎牛血清会出现少量沉淀?胎牛血清没有预老化,储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。这应该不会影响血清的质量。推荐在-20℃储存胎牛血清,避免反复冻融。
胎牛血清制备:用止血钳夹住血管,切开1厘米左右的切口进行插管,插好管后打开血管的止血钳,让牛血顺采的血管流入另一个洁净房间内的瓶中。采的血瓶采的血前经干烤灭菌(180℃2小时)后,按无菌操作注入10毫升左右经高压灭菌的生理盐水后加塞封口,于采的血前半小时放入37℃恒温箱备用。采的血前先晃动瓶内生理盐水,使其充分湿润瓶壁后倒出,再进行采的血并加塞封口。将采的血后的瓶放37℃恒温室2小时,再放入4℃冷库4小时以备离心。FBS的常见处理方法是热灭活,其中将FBS在56°C的水浴中加热30分钟,偶尔摇晃。
如何区别真假胎牛血清:主要技术指标,1、内的毒性,标准为不高于5EU/ml。内的毒性是细菌破碎后细胞壁的成分,因此内的毒性含量的高低可表现出采的血到生产一系列过程中的无菌操作情况。目前,国产血清基本都能达到这一要求,很多进口胎牛血清内的毒性含量反而更高,只要求不高于50EU/ml,高出我国标准10倍。可见,内的毒性含量偏高不影响质量,除非含量极高,预示着已经污染。2、总蛋白含量,胎牛血清一般范围是30-40mg/ml,数值偏高,说明牛龄偏大,不是胎牛,数值偏低,表明血清可能掺水了。胎牛血清是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。南京标准胎牛血清哪里有
胎牛血清在水浴过程中,胎牛血清的液面要完全浸在水中。南京标准胎牛血清哪里有
胎牛血清的功能:胎牛血清是细胞培养中用量较大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份,常用于动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能。1.提供对维持细胞指数生长的Hormone,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。2.提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他Hormone等,能结合或调变它们所结合的物质活力。3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到释放毒性作用。4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。5.起酸碱度缓冲液作用。6.提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。南京标准胎牛血清哪里有
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