植物外泌体miRNA芯片

外泌体基础医学和临床应用的探索和深入研究对如何准确及高纯度提取外泌体,并完整保存提出了更高的技术要求。外泌体可通过差速超速离心在不同离心力下沉淀样品中不同的杂质组分,并在100000×g~200000×g的转速下获取较纯的外泌体。差速超速离心技术被认为是外泌体分离的“金标准”,也是目前常用的外泌体分离和浓缩方法。该方法可通过结合0.22μm或0.45μm孔径滤膜进行超滤来提高产物纯度减少外泌体的聚集,其分离效率容易受到加速度、转子类型、旋转半径、沉降路径长度以及样品黏度等多种因素影响。免疫印迹法（WB）和Elisa检测法作为被普遍应用的外泌体检测的一般方法。植物外泌体miRNA芯片

在运输DOX的研究中，Wei等选择了已经在临床上使用的未成熟的树突细胞作为母代细胞，通过化学转染使其分泌的外泌体表面含有Lamp2b，这种蛋白可以与αv整合蛋白特异性iRGD肽结合，使外泌体对DOX的运输具有靶向性。将对iRGD肽靶向的外泌体和未经靶向性处理的外泌体用DiR染料标记，并分别静脉注射入移植了人乳腺ai细胞的小鼠体内，观察到靶向的外泌体在注射30min后已经出现在中流组织处，在注射2h后外泌体的含量高，而未经靶向性处理的外泌体在注射后主要集中在肝脏，几乎很少到达中流组织处，说明对iRGD肽靶向的外泌体具有很好的靶向性。植物外泌体miRNA芯片活内的外泌体动态（哪个外泌体迁移至何处）也会成为今后需要努力研究的重要课题。

外泌体含有的信号分子能反映分泌细胞的生理状态和功能状态,甚至还会包含细胞病态相关的分子信息,从而提供了丰富的潜在的生物标志物分子源。瘤细胞分泌的外泌体通过对大分子物质的转移和传递调节临近或远处瘤生长的微环境,对促瘤生成及瘤增生、转移发挥着不同的调节作用。瘤细胞分泌的外泌体还可以通过诱导耐药和免疫抑制来促进瘤的发展。外泌体能在4℃保存96h,或是在-70℃下保存更长时间,这些特点使得外泌体可应用于瘤的早期诊断和预后判断。靶向瘤的外泌体的标志物可能为瘤疾病的诊断和治理提供新的指标和途径,对高危人群早期诊断和早期治理以降低或减缓瘤病例的发生上发挥着重要的作用。

外泌体及其携带的组分参与肝脏细胞的增殖、再生和迁移等生理过程，在肝脏疾病和肝损伤中起着重要作用，如肝病、肝硬化、肝纤维化、酒精性脂肪肝等。抑制或阻止外泌体的分泌，或许是治理肝脏疾病的一种新型策略。此外，外泌体具有稳定性和生物安全性，也可以用作载体携带改造的基因或药物，或用作疫苗诱导免疫反应杀死瘤细胞。外泌体会起到一定的保护作用，抵抗病毒的作用。与HCV类似，HBV患者的血清中分离到的外泌体同样携带HBV核酸分子和蛋白质。HBV阳性的外泌体会主动转移HBV到肝细胞中。外泌体中HBV核酸分子还会抑制RIG-1和下游信号通路，导致NK细胞功能紊乱。蛋白质分子在外泌体信号传递过程中起到了非常重要的作用。

外泌体不只可作为疾病诊断的生物标志，而且可作为天然的药物传递载体。外泌体能够负载的治理物质包括小分子化合物、蛋白质、寡核苷酸等，且在体液中宽泛分布且具有定向归巢能力。外泌体独特的生物兼容性、高稳定性、瘤靶向性使其在未来瘤治理中有很大的利用价值。外泌体能够装载的治理物质包括小分子化合物、蛋白质、寡核苷酸等。作为小分子化合物载体，外泌体装载姜黄素、紫杉醇、阿霉素等主要是用于抗瘤研究；已经发现外泌体可递送多种蛋白质，例如酶，细胞骨架蛋白质和跨膜蛋白质；外泌体作为核酸分子的药物载体主要用于基因治理，外泌体天然的可以携带遗传（例如miRNA，siRNA）到靶细胞中，从而在生物学和致病过程中诱导遗传修饰。外泌体具有检测包括病症在内的许多病理状况的潜力，可用于对心血管疾病和病症等多种疾病的诊断和监测。植物外泌体miRNA芯片

日本和光着眼于巨噬细胞的外泌体受体Tim4蛋白，制备Tim4细胞外域与磁珠结合的“Tim4磁珠”。植物外泌体miRNA芯片

研究者利用电穿孔法对外泌体进行DOX的负载，进行体内抗中流效果的研究。实验结果显示，负载DOX的iRGD肽靶向性外泌体对中流的抑制效果远优于单纯的DOX。直接静脉注射DOX，其不仅水溶性低，而且容易使DOX与血液中的蛋白结合，从而被网状内皮系统识别捕获，起不到理想的抗中流效果。而用iRGD肽靶向性的外泌体保护DOX，可以提高DOX水溶性，避免被网状内皮系统捕捉，提高靶向性，从而降低由于用药过量和非靶向性引起的毒性，起到更好的抗中流效果。植物外泌体miRNA芯片