细胞上清外泌体miRNA测序

外泌体能携带多种生物活性分子循环于血液／体液中并介导长距离的细胞间通讯，中流来源外泌体富含的蛋白质、核苷酸、脂质等分子能够反映其来源细胞的生理及病理状态，外泌体特殊的脂质双分子层结构能保护其内RNA等分子免于降解，因此，检测中流外泌体成为液体活检一个明显优势。临床试验研究表明，外泌体在多种疾病的早期诊断、疗效和预后监测等方面都具备较好的应用价值，正逐渐成为临床诊疗中新的、理想的生物标志物和可能的靶向药物载体。随着技术的进步，组学时代的到来，大规模蛋白质组学已经被联合应用于筛选和揭示多种ai症细胞外囊泡的标志物。外泌体提纯方法中，超速离心法和聚合物沉淀法（市售试剂盒）混入多种杂质。细胞上清外泌体miRNA测序

随着科学研究的不断深入，目前已经发现外泌体是由通过细胞内吞泡膜向内凹陷形成多泡内涵体，多泡内涵体再与细胞膜融合后，释放到细胞外基质中的一种直径约30~120nm的膜性囊泡。外泌体介导瘤细胞的化疗抵抗。在瘤的治理过程中经常会出现药物耐受的情况，这会导致化疗失败，在这和过程中外泌体以多种途径参与了化疗抵抗这一过程。通常，发生EMT过程的瘤细胞可获得抵抗凋亡能力，而抵抗凋亡通常使瘤表现为化疗抵抗。瘤细胞来源的外泌体能通过传递相关的组织因子(如VEGF、TGF2β)介导细胞发生EMT，从而增加瘤细胞的化疗抵抗能力。细胞上清外泌体miRNA测序类风湿关节炎患者的滑膜成纤维细胞所释放的外泌体。

一类外泌体中常见的细胞质蛋白是Rabs蛋白，是鸟苷酸三磷酸酶(GTPases,)家族的一种。它可以调节外泌体膜与受体细胞的融合，有文献报道称RAB4,RAB5和RAB11主要出现于早期以及回收的核内体中，RAB7和RAB9主要出现于晚期的核内体。现有大量的研究发现外泌体中含有40种RAB蛋白。除了RAB蛋白，外泌体中富含具有外泌体膜交换以及融合作用的膜联蛋白（包括膜联蛋白1、2、4、5、6、7、11等）。外泌体膜上富含参与外泌体运输的四跨膜蛋白家族、热休克蛋白家族。其它一些外泌体中的蛋白包括多种的代谢类的酶、核糖体蛋白（RPS3）、信号转导因子（黑色素瘤分化相关因子,ARF1,CDC42,人类红细胞膜整合蛋白,SLC9A3R1）、粘附因子、细胞骨架蛋白以及泛素等。

外泌体的miRNA或蛋白质等遗传分子与肝脏病理息息相关，在肝脏疾病诊断中可作为潜在的治理靶点或分子标志物。对外泌体的研究，将有利于阐述肝脏及其疾病的发生和发展机制，为寻求临床可用的biomarkers和开发新的治理方法提供支持。外泌体可以通过转运蛋白和miRNAs进行细胞间交流，从而作用于周围的细胞并改变肝脏的微环境。细胞内多泡体（MVBs）与细胞膜融合，释放内部的外泌体到细胞外，被其他细胞摄取，通过细胞膜融合或内吞作用释放携带的内含物，在受体细胞中调控生理活动。外泌体介导的细胞间交流可以改变瘤的生长、细胞迁移、抗病毒等生理过程。外泌体复杂的内容物被认为是疾病诊断的无创或微创生物标志物。

外泌体特指直径在30-150nm的囊泡，其主要来源于细胞内多囊泡体，经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中。外泌体膜上富含参与外泌体运输的四跨膜蛋白家族（CD63,CD81和CD9）、热休克蛋白家族（HSP60,HSP70和HSP90），本示踪病毒使用CD63作为生物标记，通过将CD63与荧光蛋白偶联，带荧光的膜蛋白会在表达至外泌体膜上，便于后续进行、观察内化或其他实验。慢病毒载体的构建原理就是将HIV21基因组中的顺式作用元件(如包装信号、长末端重复序列)和编码反式作用蛋白的序列进行分离。外泌体具有良好的生物兼容性、稳定性和内在靶向性，使其在药物递送方向大有潜力。细胞上清外泌体miRNA测序

在过去几年中，有几个实验室报道了各种细胞类型的外泌体分泌，并讨论了其潜在的生物学功能。细胞上清外泌体miRNA测序

人体内多种细胞在正常及病理状态下均可分泌外泌体，包括干细胞、免疫细胞、内皮细胞、血小板及平滑肌细胞等。外泌体被包裹在坚硬的双层膜中。双层膜保护外泌体的内容物，使外泌体能够在组织中长距离移动。干细胞外泌体因在上皮组织的增殖、迁移、再生、炎症和瘢痕控制等方面的作用，有望成为“无细胞的细胞治理”工具。干细胞来源的外泌体可通过囊泡，将干细胞的精华部分——mRNA、miRNA、IncRNA及蛋白质等生物活性物质，打包运出干细胞体外。通过“细胞间高速公路”来“快递”到人体各个组织内。细胞上清外泌体miRNA测序