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广东靠谱的医学实验外包检测

来源: 发布时间:2023年01月15日

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医学实验外包,circRNA Pulldown(环状RNA)介绍:使用生物素RNA探针,与细胞裂解液孵育,形成探针-circRNA-蛋白质复合物。该复合物可与链亲和素标记的磁珠结合,从而与裂解液中的其他成分分离。磁珠复合物洗脱后,可通过western blot实验或质谱实验检测特定的circRNA结合蛋白是否与circRNA相互作用。RNA pull-down实验就是先将RNA进行标记(如生物素探针标记),再与细胞裂解液共同孵育,从而形成RNA-蛋白质复合物,之后再分离复合物得到蛋白质,通过western blot 或mass Spectrometry检测蛋白质的技术。目前RNA pull-down技术已成为研究miRNA、lncRNA与相互作用蛋白的主要技术手段之一。

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医学实验外包,Co-IP检测介绍。免疫共沉淀(Co- Immunoprecipitation, Co-IP)是利用抗原和抗体的特异性结合以及细菌的Protein A或G特异性地结合到免疫球蛋白的Fc片段的现象开发出来的方法。其基本原理是,在细胞裂解液中加入抗兴趣蛋白的抗体,孵育后再加入与抗体特异结合的结合于Agarose珠上的Protein A或G,若细胞中有与兴趣蛋白结合的目的蛋白,就可以形成这样一种复合物:“兴趣蛋白—抗性蛋白抗体—Protein A或G—Agarose珠”,经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,复合物又被分开。然后经免疫印迹或质谱检测目的蛋白。这种方法得到的目的蛋白是在细胞内与兴趣蛋白天然结合的,符合体内实际情况,得到的结果可信度高。这种方法常用于测定两种目标蛋白质是否在体内结合;也可用于确定一种特定蛋白质的新的作用搭档。医学实验外包一站式生物医学实验外包平台。广东靠谱的医学实验外包检测

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医学实验外包,分子机制研究,我们选好明星分子以后,调控层次就是要考虑的问题了,这里说的调控层次就是围绕中心法则展开对明星分子本身的探索,我们知道中心法则涉及到DNA-RNA-蛋白三个层面,根据调控的层次一般我们又分为转录水平和转录后水平,转录我们知道是发生在细胞核里面的。所以我们看到某个分子定位在细胞核时我们一般就从转录水平进行考虑,比如转录因子对DNA序列的结合,DNA甲基化、组蛋白修饰等等,而当RNA被转录出来后要经过加工过程,比如可变剪接,miRNA介导的降解,mRNA翻译成蛋白,蛋白合成后会被磷酸化修饰或者泛素化修饰从而***或者降解等等,这些是转录后的水平。那么我们在确定明星分子后,一般来说需要首先确定的是变化发生在哪个层面,是RNA还是蛋白,是蛋白的产生(翻译)、降解(比如泛素化)还是活化(比如磷酸化),从而把研究的焦点集中到明星分子的某个过程,这个层面是围绕一个明星分子的前世今生来展开的。广东靠谱的医学实验外包检测

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