病理实验外包,冰冻切片取样实验步骤:一、取材应尽可能快地采取新鲜的材料,防止组织发生死后变化。二、速冻1.将组织块平放于软塑瓶盖或特制小盒内(直径约2cm)。2.如组织块小可适量加OCT包埋剂浸没组织,然后将特制小盒缓缓平放入盛有液氮的小杯内。3.当盒底部接触液氮时即开始气化沸腾,此时小盒保持原位切勿浸入液氮中,大约10~20s组织即迅速冰结成块。4在制成冻块后,即可置入恒冷箱切片机冰冻切片。5.若需要保存,应快速以铝箔或塑料薄膜封包,立即置入-80℃冰箱贮存备用。三、固定1.样品托上涂一层OCT包埋胶,将速冻组织置于其上,4℃冰箱预冷5~10min让OCT胶浸透组织。2.取下组织置于锡箔或者玻片上,样品托速冻。3.组织置于样品托上,其上再添一层OCT胶,以完全覆盖为宜,速冻架(PE)上30min。病理实验外包检测 [南京英瀚斯] 一站式病理实验外包检测平台。江苏专业的病理实验外包哪家靠谱
病理实验外包,病理染色常见染色介绍免疫荧光染色:免疫荧光技术(Immunofluorescence technique )又称荧光抗体技术,是标记免疫技术中发展比较早的一种。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法称荧光抗体法;用已知的荧光抗原标记物示踪或检查相应抗体的方法称荧光抗原法。这两种方法总称免疫荧光技术。在实际工作中荧光抗原技术很少应用,所以人们习惯将荧光抗体技术称为免疫荧光技术。免疫学的基本反应是抗原-抗体反应。由于抗原抗体反应具有高度的特异性,所以当抗原抗体发生反应时,只要知道其中的一个因素,就可以查出另一个因素。免疫荧光技术就是将不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在抗体(或抗原)上,与其相应的抗原(或抗体)结合后,在荧光显微镜下呈现一种特异性荧光反应。南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。江苏专业的病理实验外包哪家靠谱南京英瀚斯生物,病理实验外包检测,很靠谱。
病理实验外包,病理染色常见染色介绍普鲁士蓝染色:普鲁士蓝染色(Prussianbluereaction)又称为含铁血黄素染色,即经过亚铁**钾和稀酸处理后可以产生蓝色,常见于吞噬细胞内会间质内,主要显示三价铁盐。Perls普鲁士蓝是非常经典的组织化学反应,是显示组织内三价铁的一种敏感、传统优良的方法,其染色原理为:亚铁**钾溶液使三价铁离子从蛋白质中被稀盐酸分离出来,三价铁与亚铁**钾反应,生成一种不溶解的蓝色化合物即三价铁的亚铁**物普鲁士蓝,所以该反应被称为普鲁士蓝反应。三价铁的亚铁**物是一种很稳定的化合物,在反应后可用红色染色剂进行复染,如核固红、伊红、中性红等。Perlsstain常用于显示局部组织内各种出血***变,常见于吞噬细胞内。在判断含铁血黄素沉积时,用Perls反应可以得到证实,该染色方法可以很好的区分含铁血黄素和其他色素。该染色液稳定性好、可以长期保存、不易产生沉淀、应用范围广、可以进行复染。南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。
1.取材与固定固定剂同时具有硬化细胞组织的作用,使制片便于进行。2.洗涤与脱水洗涤是把深入组织中的固定剂洗去,防止染色中的结晶产生,驱除组织中的水分,利于透明和浸蜡。3.透明与浸蜡(透蜡)脱水后的组织中水分已被透明剂所代替,而有利于浸蜡。浸蜡的目的是使组织有一定的硬度而有利于切片和细胞组织保持一定的生活时状态。4.包埋与切片用石蜡和其他包埋剂(组织填充剂作包埋剂)包绕一定的形状以便于切片。将包埋好的组织块用切片机切成一定的厚度(厚度以um计)。5.贴片(展片、捞片)和染色将已且妥的切片在温水中展平整后用载玻片贴上,稍晾干后再烤片。染色可使细胞和组织被染上不同的颜色而产生一定的折射率,便于显微镜观察。6.切片染色后用胶类物质将其封固,便于长期保存。南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。不容错过的病理实验外包研究方法,南京英瀚斯生物。
病理实验外包,病理染色常见染色介绍TTC染色:TTC染色是TTC和活细胞线粒体内的琥珀酸脱氢酶反应,生成红色的甲月赞,用来表示细胞的活力。配制多为2%,染色要避光,37度条件下,它是评价脑缺血损伤常用的指标。TTC(2,3,5—氯化三苯基四氮唑)是脂溶性光敏感复合物,1894年初次合成用来检测种子的生存能力,1958年开始用来染色检测哺乳动物组织的缺血梗塞。它是呼吸链中吡啶—核苷结构酶系统的质子受体,与正常组织中的脱氢酶反应而呈红色,而缺血组织内脱氢酶活性下降,不能反应,故不会产生变化呈苍白。TTC可以被活细胞中的具有还原活性的酶(好像主要是琥珀酸脱氢酶)还原生成粉红色的还原产物,所以活组织部分呈现粉红色,而死亡的细胞的还原酶的活力已经消失,因此TTC不能被还原,所以死亡的组织呈现白色。南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。病理实验外包,科研实验好帮手。江苏专业的病理实验外包哪家靠谱
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病理实验外包,染色包埋的知识:知识点1:包埋的概念组织经过固定、脱水、透明和浸蜡等过程后,用包埋剂(石蜡、火棉胶、树脂等)将组织块包埋成块,使得组织和包埋剂相熔一体并迅速冷却,这个程序称为包埋。知识点2:组织石蜡包埋法石蜡包埋法是制作光学显微镜切片的常规方法,包埋后的组织可以长期保存。包埋的方法有包埋机包埋和手工包埋两种。知识点3:体液石蜡包埋法痰液、胃液、尿液、胸腔积液、腹水等可以行石蜡包埋。痰液应当选用含血液的部分或较为可疑的实体部分,滴上伊红后用皱纹纸包好,然后用10%的中性甲醛固定,再经常规脱水,透明、浸蜡并包埋。新鲜的胃液、尿液、胸腔积液、腹水等体液标本,倒去上层的澄清液体,将浑浊的液体放入离心管中,以转速2000-3000转每分钟离心15分钟,倒去上清液后,用10%中性甲醛固定沉淀物,然后进行脱水透明、浸蜡、包埋。江苏专业的病理实验外包哪家靠谱