具有上述形态特点的liu也*有23％为MSI-H。TIL对判断liuMSI状态较其他形态指标相对特异，但在HE切片上识别TIL有一定困难，文献报道采用CD3免疫组织化学染色辅助，以每高倍视野(HPF)8个CD3TIL为临界值，其特异性和灵敏性分别为75％和67％。三、MSI检测的主要方法在经济和有效的辅助检测手段缺乏的年代，形态学指标也许对筛选MSI-H结直肠ai及Lynch综合征患者有很好的提示作用，但无论从特异性、敏感性还是证据的直接性、客观性方面，形态学指标都与分子检测指标存在差距。在越来越重视客观证据的现代医疗实践中，辅助检测手段被越来越多地应用到MSI-H结直肠ai的筛查中。如前所述，MSI是MSI结直肠ai的分子特征，错配修复基因功能缺陷是MSI结直肠ai发生的分子基础，因此检测liu的MSI状态和／或错配修复缺失状态是诊断MSI结直肠ai**直接的依据。1．免疫组织化学检测错配修复蛋白：一种或多种错配修复蛋白的功能缺失可引起MSI-H，因此，检测错配修复蛋白缺失情况可间接反应liu的MSI状态。错配修复蛋白在正常肠腺上皮细胞，特别是腺体基底部细胞以及淋巴细胞、平滑肌细胞、血管内皮细胞等间质细胞的胞核中均有表达，可作为内对照。迈杰转化医学希望能和创新型药企共同探索创新生物标志物的临床应用潜力。广东dMMR抗体检测试剂技术指导
对细胞表面和细胞内的各种抗原成分进行定位研究。免疫酶标技术是目前*常用的技术。本方法与免疫荧光技术相比的主要优点是：定位准确，对比度好，染色标本可长期保存，适合于光、电镜研究等。免疫酶标方法的发展非常迅速，已经衍生出了多种标记方法，且随着方法的不断改进和创新，其特异性和灵敏度都在不断提高，使用也越来越方便。目前在病理诊断中广为使用的当属***法、ABC法、SP法等。3、免疫胶体金技术免疫胶体金技术是以胶体金这样一种特殊的金属颗粒作为标记物。胶体金是指金的水溶胶，它能迅速而稳定地吸附蛋白，对蛋白的生物学活性则没有明显的影响。因此，用胶体金标记一抗、二抗或其他能特异性结合免疫球蛋白的分子(如葡萄球菌A蛋白)等作为探针，就能对组织或细胞内的抗原进行定性、定位，甚至定量研究。由于胶体金有不同大小的颗粒，且胶体金的电子密度高，所以免疫胶体金技术特别适合于免疫电镜的单标记或多标记定位研究。由于胶体金本身呈淡至深红色，因此也适合进行光镜观察。如应用银加强的免疫金银法则更便于光镜观察。四、免疫组化技术的优点1、特异性强免疫学的基本原理决定了抗原与抗体之间的结合具有高度特异性，因此。广东dMMR抗体检测试剂技术指导MSH2抗体试剂 苏苏械备20180568号.
％的MLH1启动子甲基化或MLH1表达缺失的结直肠ai中存在BRAF基因V600E突变，而且除极个别报道外，BRAF突变几乎从不发生在Lynch综合征相关结直肠ai中，因此检测liu是否存在MLH1启动子甲基化和BRAF基因V600E突变可作为区分散发性MSI-H结直肠ai与Lynch综合征相关结直肠ai的重要参数。2．MSI-H结直肠ai的临床病理特征：Lynch综合征相关性结直肠ai与散发性MSI-H结直肠的临床病理特征大致相同。与MSS结直肠ai相比，MSI-H结直肠ai好发于右半结肠，组织学类型以黏液腺ai和低分化腺ai多见，liu内有明显的上皮内淋巴细胞浸润(tumorinfiltratinglymphcytes，TIL)，较少见到腺腔内坏死，liu边缘呈膨胀性浸润，周围可见Crohn病样淋巴细胞聚集(图1)，淋巴结转移发生率较低。相对于Lynch综合征，散发性MSI-H结直肠ai发病年龄较大，女性相对多见，更易发生在右半结肠。图1MSI-Hliu的形态特点；liu呈低分化或伴黏液分化，伴***的上皮内淋巴细胞浸润(A，HE中倍放大)，liu前缘呈膨胀性浸润，周围见Crohn病样淋巴细胞聚集灶(B，HE低倍放大)尽管MSI-H结直肠ai的病理特征与MSSliu存在一定差别，但除TIL外，其他形态指标的特异性和敏感性均较低，即使结合发病年龄等因素(<60岁)。
50岁，结直肠liu或其他liu家族史阳性、吸烟、超重、有胆囊手术史、血吸虫病史等，可考虑用阿司匹林等非甾体***药和选择性环氧合酶－2抑制剂***，但必须注意药物不良反应及使用禁忌证。二级预防即结直肠腺瘤摘除后预防再发或恶变。目前，学术界比较公认的预防腺瘤切除术后复发的药物是非甾体***药和选择性环氧合酶－2抑制剂。另外，补充钙剂和维生素D、高纤维饮食、肠道代谢物如短链脂肪酸也被认为具有一定的预防价值。2011年发表的《中国结直肠liu筛查、早诊早治和综合预防共识意见(二)》对于我国结直肠ai化学预防给出了明确的指导意见。由于内镜检查依从性较差，结合我国城乡卫生资源分布不均衡的现状，完全依靠内镜下摘除结直肠腺瘤预防结直肠ai发生的方案并非完美。上述共识建议辅助相应以药物或环境干预为基础的一级预防。预防结直肠腺瘤发生或再发是结直肠ai化学预防的**终目的。五、我国结直肠ai筛查及预防工作中的问题1.对结直肠ai认识不足、人群筛查依从性较差：随着我国经济和现代化建设的深入，我国公民饮食结构及生活方式较30年前发生了较大改变，结直肠ai近20年发病率及病死率不断攀升。结直肠ai本身疾病特点鲜明，发病隐匿、恶变时间长、早期liu***率高。迈杰转化医学设有病原体检测平台Qiastat-Dx进行呼吸道及胃肠道病原体检测。
选择靠近n末端的氨基酸区域1-100位氨基酸序列与gst蛋白融合表达为抗原片段，抗原片段的dna编码序列为seqid**。二.重组msh6蛋白片段的表达和纯化将seqid**的dna序列直接合成并克隆进克隆载体质粒puc57(南京金斯瑞生物科技有限公司)。该dn**段5’端和3’端分别带有ecori和xhoi酶切位点，取5μl(约1微克)带有msh6片段的质粒puc57-msh6和用作载体的pet30a-gst(merck)5μl(约1微克)分别进行双酶切，酶切体系为：ecori(takara)1μl，xhoi(takara)1μl，5μl10×bufferh，38μlddh2o，37℃酶切三小时。酶切产物经1％琼脂糖电泳，柱离心式dna回收试剂盒(北京华大蛋白质研发中心有限公司)切胶回收基因和载体片段。取2μl回收的线性化载体，3μl酶切回收的msh6基因片段，5μl2×ez-ligt4dna快连试剂(北京华大蛋白质研发中心有限公司)，混匀，室温连接三十分钟。取出-80℃保存的感受态细胞(bl21)，解冻后加入连接产物，冰上放置30min。42℃热激90秒后冰浴2min后，加入800μl无抗性的lb培养基。37℃复苏培养20min，涂板。从转化的平板挑单克隆到，37℃，200rpm培养，dna测序(北京华大基因)。将测序正确的克隆菌液2ul活化的菌液到5mllb液体培养基中，37℃，200rpm，培养。覆盖多个主流IHC自动染色平台，适用范围广。广东dMMR抗体检测试剂技术指导
迈杰转化医学可以提供覆盖肺ai、肠ai、肝ai、胃ai、乳腺ai、前列腺ai等多种实体瘤的上百项检测项目。广东dMMR抗体检测试剂技术指导
微卫星不稳定（microsatellite instability, MSI）
微卫星不稳定性是指与同一个体的正常组织细胞的DNA相比，liu细胞的基因组DNA中单个、两个、三个、四个或五个核苷酸组成的重复序列的长度发生了改变。liu组织表现出的微卫星不稳定性可按照所测标记物的不稳定程度分为高不稳定性（MSI-H）、低不稳定性（MSI-L）和微卫星稳定（MSS）。
错配修复缺陷（differentMismatchRepair,dMMR）DNA错配修复系统MMR（MismatchRepair）是由一系列高度保守的基因及其表达的产物酶构成，具有维持DNA复制的高保真度和基因组稳定性、降低自发突变的功能。DNA错配修复系统缺陷会造成微卫星不稳定情况。通常认为dMMR与MSI-H在生物学上具有一致性，而MSI-L和MSS则是MMR正常（proficientmismatchrepair，pMMR）的表型。 广东dMMR抗体检测试剂技术指导